а) Иммунохимические исследования. При проведении иммунохимических исследований большинство полипептидных, стероидных и тиреоидных гормонов обнаруживаются с помощью АТл. Данная методика отличается высокой чувствительностью и является автоматизированной. Концентрация гормона обычно указывается в МЕ/л, а не в массе на 1 л (табл. 3). При интерпретации иммуноанализа используется несколько понятий: «референсный стандарт», hook effect/«прозоновый эффект», «биологическая активность», «нормальные значения» и дополнительные исследования на гормоны.
Во-первых, чтобы свести к минимуму вариабельность результатов, необходим типовой образец для стандартизации анализов. Референсный стандарт является своеобразным ориентиром, который обеспечивает сопоставимость по времени и по методу. Такие стандартизированные тест-системы производятся ВОЗ и Национальными институтами 30. Более 20 тест-систем используются для измерения уровней ЛГ, ФСГ, пролактина и ХГЧ. Таким образом, важно знать, какой референсный стандарт применялся при проведении конкретного анализа, т.к. результаты могут существенно отличаться.
В клинической практике это играет особую роль при подозрении на внематочную беременность, когда уровень β-ХГЧ измеряется в разл. МО.
Во-вторых, на интерпретацию результатов может повлиять hook effect/возникновение эффекта прозоны. При данном состоянии выраженное повышение уровней эндогенных гормонов препятствует образованию реакции АГн-АТл, и, как следствие, не происходит необходимого связывания гормонов. Этот процесс приводит к л/о-результатам. Одним из примеров является "-"-результат теста мочи на беременность у женщины с полным пузырным заносом. Как правило, разведение образца может помочь устранить hook effect.
Важно отметить, что количество гормона в образце не обязательно соответствует биологической активности гормона. Напр., известны несколько изоформ пролактина, часть из которых определяются иммунологически, но они не являются биологически активными. Также считается, что разл. паттерны гликозилирования гонадотропинов в разное время репродуктивного периода изменяют их биологическую активность.
Если результат находится в рамках референтного диапазона, это не всегда свидетельствует об отсутствии нарушений. Для многих гормонов часто устанавливается широкий референтный диапазон. Иначе говоря, уровень гормона может удвоиться, но оставаться в пределах нормы, при этом быть патологическим для конкретного пациента.
Наконец, для подтверждения правильности результата может потребоваться дополнительное исследование на определение уровней др. гормонов. Установлено, что для оценки функции гипофиза и его органов-мишеней достаточно измерения концентрации гормонов гипофиза. Напр., высокий уровень циркулирующих гонадотропинов почти всегда обусловлен недостаточностью функции яичников и потерей отрицательной обратной связи. Это связано с тем, что повышенная выработка гипофизом функционального димера происходит редко.
И наоборот, низкий уровень гонадотропина можно объяснить скорее гипоталамо-гипофизарной дисфункцией, чем недостаточностью функции яичников. Т.о., данное состояние возможно выявить при оценке уровня гормонов, вырабатываемых яичниками, напр. эстрогенов.
В ряде случаев м.б. показано измерение уровня как гормонов гипофиза, так и целевых гормонов. Напр., во многих лабораториях при выявлении аномального значения ТТГ автоматически проводят измерение уровня гормонов ЩЖ. Низкие уровни как стимулирующего гормона, так и целевого гормона указывают на нарушение функции гипоталамуса или гипофиза. Высокие уровни гормона железы-мишени в сочетании с низкими уровнями стимулирующего гормона гипофиза свидетельствуют об автономной секреции органом-мишенью, как это происходит при гипертиреозе при болезни Грейвса.
б) Стимуляционная проба и подавляющий тест. Стимуляционные пробы проводятся при подозрении на гипофункцию эндокринного органа. С помощью эндогенного стимулирующего гормона проводится оценка резервных возможностей интересующей ткани. Трофический гормон м.б. гипоталамическим рилизинг-фактором, таким как ГнРГ или тиреотропин-рилизинг-гормон. В качестве альтернативы возможно применение ХГЧ (аналог ЛГ) или лейпрорелина ацетата (аналог ГнРГ). Реакция железы-мишени отмечается при увеличении уровня соответствующего гормона в плазме.
Напр., тест на стимуляцию лейпролида ацетатом используется для оценки нарушений полового развития и описан в отдельной статье на сайте (просим Вас пользоваться формой поиска по сайту выше). Лейпролида ацетат используется для замещения ГнРГ, т.к. ГнРГ, применяемый в клинической практике, часто недоступен (Rosenfield, 2013).
Подавляющий тест проводится при подозрении на гиперфункцию эндокринной системы. Напр., дексаметазоновый тест выполняют при подозрении на гиперкортизолизм (болезнь или синдром Кушинга). Вышеупомянутый тест подробно описан в отдельной статье на сайте (просим Вас пользоваться формой поиска по сайту выше). С его помощью измеряется способность дексаметазона ингибировать секрецию АКТГ и, следовательно, выработку кортизола надпочечниками. Если ГКС-терапия не подавляет выработку кортизола, это является признаком первичного гиперадренализма.
Видео №1: андрогены в норме и при патологии у женщин, мужчин
Видео №2: анализ на женские половые гормоны в норме и при патологии
