Современная молекулярная диагностика в стоматологии. Ценность молекулярной диагностики
Внедрение в практику стоматологии современных молекулярных методов открывает новые перспективы в решении вопросов этиологии и патогенеза стоматологических заболеваний. Несомненно, возможность идентификации новых, малоизученных бактериальных форм, оказывающих влияние на развитие патологических процессов в тканях и органах челюстно-лицевой области, будет иметь существенное значение для решения насущных задач профилактики и лечения.
В настоящее время большинство ученых используют универсальные праймеры в попытках охарактеризовать все микробное сообщество. Однако необходимость создания праймеров, специфичных для микрофлоры ротовой полости, заставляет обратиться к методам культивирования. Ввиду объективных ограничений метода ПЦР и иммунохимического анализа требуется проверка получаемых праймеров и антител на чистой культуре микроорганизмов. Только после такой проверки можно уверенно применять новые препараты в диагностике пародонтита и других заболеваний ротовой полости.
При лечении пациентов с ВЗП нередко применяют антибиотики. Проблема выбора антибактериальных средств, контроля их эффективности, выявление резистентности микроорганизмов к назначенному лечению могут решаться посредством использования молекулярных методов. Поскольку зачастую в клинике антибактериальные препараты назначаются без должного учета всех факторов, задачу внедрения молекулярных методов исследования, в частности ПЦР, в клиническую стоматологию на сегодняшний день следует признать в высшей степени актуальной.
Применение методов молекулярной диагностики также способствует развитию исследований в области изучения генов устойчивости к антибиотикам. Так, ПЦР была использована для выявления локусов ДНК, ответственных за устойчивость к тетрациклину и эритромицину у анаэробных микроорганизмов (Fusobacterium, Prevotella, Porphyromonas). Местное назначение тетрациклина, по данным ряда авторов, может приводить к появлению в ПК бактерий, устойчивых к этому. Согласно Villedieu и соавт. (2002), примерно 11 % культивируемых организмов ротовой полости устойчивы к тетрациклину. Показано разнообразие генов устойчивости к тетрациклину в микрофлоре ротовой полости у взрослых здоровых лиц.
Интересные результаты были продемонстрированы этими авторами при исследовании образцов слюны и зубных бляшек, полученных от 20 здоровых взрослых, не принимающих антибиотики в течение предыдущих 3 мес. Было описано 8 классов генов устойчивости к тетрациклину, кодирующих рибосомный белок и найденных у Veilonella, Prevotella, Streptococcus, Staphylococcus, Streptomyces, Lactobacillus, Neisseria, Enterococcus. Гены устойчивости обнаружены как у грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов.
Гены устойчивости грамотрицательных микроорганизмов широко распространены по геному и связаны с большими плазмидами, большинство из которых способно перемещаться. Гены устойчивости грамположительных микроорганизмов обычно находятся на малых передающихся плазмидах. Показано, что некоторые бактерии (Neisseria, Haemophilus, Streptococcus) распространяют гены устойчивости к тетрациклину посредством транспозонов. В другом исследовании было обнаружено, что многие виды бактероидов несут большое количество новых самопередающихся хромосомных элементов с геном устойчивости к тетрациклину Тс. Некоторые элементы несут также ген устойчивости к эритромицину Tm. Эти элементы вставлены в хромосому бактероидов и передаются самостоятельно от хромосомы донора к хромосоме реципиента.
Следует признать, что изучение устойчивости у бактерий ротовой полости к различным антибиотикам в настоящее время является одним из приоритетных научных направлений.
