MedUniver Стоматология
  Домой Медицинский фото атлас Психология отношений Медицинские видео ролики Медицинская библиотека Консультация врача  
Стоматология:
Стоматология
Анатомия полости рта
Аномалии прикуса
Болезни окружения зубов
Заболевания полости рта
Операции в полости рта
Протезирование зубов
Протезирование коронками
Протезирование мостовидными протезами
Протезное ложе
Рекомендуем:
Остальные разделы:
Абдоминальная хирургия
Анатомия человека
Акушерство
Биология
Генетика
Гепатология
Гигиена труда
Гинекология
Гистология
Дерматология
Оз и Оз
Кардиология
Лучевая медицина
Микробиология
Неврология
Неотложная хирургия
Отоларингология
Офтальмология
Профилактика заболеваний
Психология
Пульмонология
Физиология человека
Скорая помощь
Стоматология
Топографическая анатомия
Травматология
Фармакология
Необходимое:
Книги по медицине
Видео по медицине
Фотографии по медицине
Консультации врачей
Форум
 

Сочетание ПЦР и культивирования. Ценность методов культивирования в стоматологии

Интересным примером сочетания двух методов — ПЦР и культивирования — является исследования ДНК (РНК) для обнаружения патогенных микроорганизмов, вызывающих болезни пародонта, с использованием бактериальной культуры. На первом этапе проводят посев клинических образцов на микробиологические среды (первичный бактериальный посев). Затем полученная смешанная бактериальная культура изучается с помощью методов молекулярной диагностики. Данный подход позволяет идентифицировать намного большее количество образцов бактериального налета и зубных бляшек, сокращает суммарное время анализа и повышает чувствительность метода исследования благодаря молекулярным методам, но в то же время первичный посев снимает проблему излишней чувствительности метода ПЦР.

Ряд авторов указывают на расхождение данных, полученных с помощью культуральных методов, и результатами исследований с применением молекулярных методов диагностики микрофлоры ротовой полости. Это объясняется, в частности, несовершенством принятых в классической микробиологии способов видовой идентификации бактерий посредством изучения их биохимических характеристик, а также наличием в клинических образцах некультивируемых микроорганизмов. Например, из 160 образцов, полученных культуральным методом и достоверно определенных на основе биохимических характеристик как P. intermedia, 29 были идентифицированы неверно. При оценке методом ПЦР 24 из них оказались P. nigrescens, 4 — Prevotella spp., 1 — Porphyromonas spp.

Развитие новых технологий позволило разработать большое количество молекулярных методов, основанных на ПЦР, которые имеют значительные преимущества в скорости и чувствительности. Одним из молекулярных методов является ПЦР в реальном времени (real-time PCR). Она позволяет проводить детекцию продуктов амплификации в процессе реакции и вести мониторинг кинетики накопления ампликонов. Детекция продуктов амплификации проводится в реакционном растворе за счет специфичной гибридизации продукта с олигонуклеотидным зондом, несущим флюоресцентную метку. В процессе реакции происходит высвобождение флюоресцентной метки в раствор, что дает возможность ее определения на флюоресцентном детекторе.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Метод демонстрирует высокую положительную прогнозирующую ценность в обнаружении некультивируемых и трудно культивируемых видов бактерий. В сравнительных исследованиях поддесневых образцов бляшки от 259 пациентов с тяжелым пародонтитом отмечена высокая линейная корреляция между положительными и отрицательными результатами бактериального метода и ПЦР в реальном времени. Эти результаты подтверждаются другими исследованиями. Также найдена положительная корреляция между ПЦР и бактериологическими методами в количественной оценке бактерий, начиная с 104 бактериальных клеток в 1 мл.

Таким образом, метод ПЦР имеет решающее значение для диагностики представителей анаэробной микрофлоры, микроаэрофилов, внутриклеточных паразитов, так как они относятся к некультивируемым или трудно культивируемым микроорганизмам.

Однако метод ПЦР при своей все более увеличивающейся популярности ни в коем случае не заменяет, а лишь дополняет спектр традиционных методов (микроскопический, культуральный, биохимический и т. д.), используемых в диагностике заболеваний пародонта.

Учитывая достоинства и недостатки различных методов идентификации микроорганизмов, рекомендуется проведение комплексных клинико-лабораторных исследований. Изучение микрофлоры ротовой полости с применением комплекса микробиологических методов — от классических до молекулярных — способно помочь в решении многих фундаментальных и прикладных задач стоматологии:
• диагностика инфекционных заболеваний (определение качественного и количественного состава микрофлоры ротовой полости);
• определение антибиотикоустойчивости исследуемых микроорганизмов;
• осуществление контроля эффективности лечения.

культуры зубных бляшек
Культуры зубных бляшек

- Читать далее "Исследования иммунитета в стоматологии. Оценка местного иммунитета"


Оглавление темы "Диагностические методы в стоматологии":
1. Микроскопия и культивирование в стоматологии. Определение чувствительности к антибиотикам
2. Биохимические методы идентификации в стоматологии. Биохимия зубных бактерий
3. Капиллярный электрофорез в стоматологии. Иммунохимические методы анализа
4. Ценность иммунохимических методов анализа. Гибридизация in situ в стоматологии
5. Полимеразная цепная реакция в стоматологии. Ценность ПЦР для стоматолога
6. Современная молекулярная диагностика в стоматологии. Ценность молекулярной диагностики
7. Сочетание ПЦР и культивирования. Ценность методов культивирования в стоматологии
8. Исследования иммунитета в стоматологии. Оценка местного иммунитета
9. Иммуногистология заболевания пародонта. Функциональная активность ПМЯЛ
10. Специфические факторы защиты пародонта. Цитотоксические реакции
Загрузка...

   
MedUniver.com
ICQ:493-344-927
E-mail: reklama@meduniver.com
   

Пользователи интересуются:

Будем рады вашим вопросам и отзывам:

Полная версия сайта