Исследование жевательного аппарата. Методы опытов на собак для оценки жевательных мышц
Для постановки серии опытов использовались беспородные собаки обоего пола массой 12—15 кг в возрасте 1,5—3 лет. Исследования были проведены на 87 животных, кроме того, 10 животных составили контрольную группу.
С помощью пластмассовой каппы, укрепленной на передних зубах нижней челюсти, расстояние между альвеолярными отростками в области дистальных премоляров увеличивалось на 2, 4, 6, 8, 10 мм. Сроки наблюдений находились в пределах от 1 до 120 сут. Электромиографические исследования были проведены на 27 животных. Испытуемые животные во время записи электромиограмм находились в экранированной камере. Игольчатый электрод вводили в области моторной точки левой собственно жевательной мышцы, для нахождения которой использовали постоянный ток от универсального электроимпульсатора (УЭИ-1).
Биотоки мышц подавали на вход усилителя биопотенциалов УБП1-02. Кроме визуального наблюдения на экране электронно-лучевой трубки, электромиограммы регистрировались шлейфным осциллографом М-700 на негативную флюорографическую пленку РФ-3 со скоростью движения последней 12 см/с.
Прослушивание биоэлектрической активности мышц осуществлялось с помощью репродуктора для звукового воспроизведения колебаний потенциалов мышц. Регистрация электрической активности производилась при сомкнутом положении челюстей без жевания. Характеристика биопотенциалов покоя осуществлялась по величине амплитуды и частоте колебаний в секунду.
По окончании опыта животных умерщвляли декапитацией. Из различных участков поверхностного слоя правой собственно жевательной мышцы вырезали кусочки, которые фиксировали в 10% нейтральном формалине и жидкости Карнуа. Гистологические срезы получали с парафиновых блоков и на замораживающем микротоме окрашивали гематоксилин-эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону, по Маллори, фукселином по Вейгерту, по Харту, на аргирофильные волокна по Футу. Нервные элементы импрегнировали по Бильшовскому — Грос в модификации Б. И. Лаврентьева. Для изучения состояния миелиновых нервных волокон материал обрабатывали по методу Марки.
Наряду с указанными методиками во всех случаях также были применены гистохимические методы исследования нуклеопротеидов, при этом ДНК выявляли с помощью реакции Фельгена, РНК — окраской пирони-ном-метиловым зеленым (реакция Браше). Кислые мукополисахариды определяли толуидиновым синим и диализованным железом по Хейлу. Гликоген окрашивали тю Шабадашу, нейтральные мукополисахариды определяли при помощи ШИК-реакции.
Для выявления липидов применяли окраску срезов Суданом и нильским голубым. Аскорбиновую кислоту (АК) в собственно жевательных мышцах изучали по методу Бакхуса. Сукцинатдегидрогеназу (СДГ) и щелочную фосфатазу выявляли в срезах, полученных из свежезамороженной ткани в отечественном криостате МК-25 с помощью ножа глубокого охлаждения. Все гистохимические методики производились с соответствующими контрольными реакциями.
Площадь поперечного сечения мышечных волокон определяли с помощью гистометрическои методики. В каждом препарате подсчитывали 50 волокон с использованием окулярной измерительной сетки Г. Г. Автандилова (1972).