Серологическая диагностика грибка при отомикозе. Реакция агглютинации (РА)
Серологическая диагностика грибковых заболеваний проводится посредством реакций агглютинации и связывания комплемента. По методике постановки эти реакции не отличаются от таких же реакций с микробными антигенами. Грибковые антитела изучались многими авторами в сыворотках, полученных от животных после иммунизации их различными грибками.
Обнаружение антител (агглютининов) в сыворотке больного грибковым заболеванием путем постановки реакции агглютинации, по данным большинства авторов, не всегда удается. Так, Ravaut и Rabeau на материале своих наблюдений пришли к заключению, что реакция агглютинации при существующей методике не может служить надежным методом диагностики грибковых заболеваний и, следовательно, не имеет практического значения.
По данным Ф. Г. Марченковой, у здоровых людей реакция агглютинации с дрожжевыми антигенами была положительной у 15,2% при разведении сыворотки 1 : 20—1 :40, а у больных поверхностными кандидамико-зами кожи — у 62,7% больных и в более высоких разведениях 1:120—1:320.
Для диагностики грибковых заболеваний применяется и реакция связывания комплемента, при этом в качестве антигена употребляют очищенные препараты, выделяемые различными методами из клеток грибков. Эта реакция отличается достаточной чувствительностью и специфичностью при генерализованных или висцеральных формах грибковых заболеваний (А. М. Ариевич, Л. С. Резникова, З. Г. Степанищева).
При поверхностных формах грибковых поражений получены авторами неопределенные и разноречивые результаты исследований сыворотки крови больных на наличие в ней субстанций, отклоняющих комплемент. В наблюдениях Gougerot, Ravaut, Rabeau и др. эта реакция часто оказывалась положительной у здоровых людей, и поэтому они пришли к выводу о малой диагностической ценности данного метода. По данным Ф. Г. Марченковой, при поверхностных кандидамикозах титры антител, связывающих комплемент, не высокие — в разведении 1 : 5.
У здоровых людей положительные реакции связывания комплемента с дрожжевыми антигенами при разведении 1:5, по данным ее работы, встречаются в 4,2%.
Мы провели серологические исследования больным отомикозом посредством реакции агглютинации и связывания комплемента. Для этого у больных через 5— 6 часов после еды из локтевой вены брали стерильным шприцем кровь в количестве 5 мл в стерильную сухую пробирку. Пробирку помещали в термостат на 1 час при температуре 37°, после чего сгусток крови отделяли от стенок пробирки стерильной стеклянной палочкой, а прозрачную сыворотку отсасывали пипеткой и использовали для постановки реакции агглютинации и для реакции связывания комплемента.
(Серологические реакции производили в серологической лаборатории микологического отдела Центрального кожно-венерологического института Министерства здравоохранения старшим научным сотрудником Л. С. Резниковой. Антигены для проведения реакций агглютинации и связывания комплемента готовили также непосредственно в микологическом отделе этого института.)
Реакция агглютинации с дрожжевыми антигенами была произведена у 26 больных отомикозом; у 15 из них возбудителями были дрожжеподобные грибки, а у 11 — аспергиллы и пенициллы. У всех больных при этом были получены положительные реакции агглютинации с дрожжевыми антигенами. Положительные реакции в пределах небольшого разведения сыворотки 1 : 30— 1 : 60 были зарегистрированы у 14 больных. Так, положительная реакция агглютинации в разведении сыворотки 1 :30 была у 1 больного, в разведении 1 :40 — у 4 больных и при разведении 1 : 60 — у 9 больных.
У остальных больных положительные реакции агглютинации с дрожжевыми антигенами были при относительно более значительных разведениях сыворотки. Так, у 8 больных — при разведении сыворотки 1 : 80, у 1 больного— при разведении 1 : 120, у 1 больного — при разведении 1:240, у 1 больного — при разведении 1:320 и у 1 больного — при разведении 1 : 480. При этом следует отметить, что положительные реакции агглютинации с дрожжевой вакциной при относительно большем разведении отмечены у подавляющего числа больных, у которых возбудителями отомикозов были дрожжеподобные грибки.
Так, из 15 больных кандидамикозами слуховых проходов, которым производили соответствующие реакции, положительные ответы были при следующих разведениях сыворотки: у 7 больных — при 1:60, у 5 больных — при 1 :80, у 1 больного — при 1 :240, у 1 больного — при 1 :320 и у 1 больного — при 1 :480. У всех этих больных процесс в ушах был двусторонним.
Положительные реакции агглютинации с дрожжевыми антигенами в разведении от 1 : 30 до 1 :80 многими авторами считаются нормальными, так как, по их данным, в этом разведении они часто бывают положительными у людей, не страдающих грибковыми заболеваниями. Однако даже такая небольшая иммунологическая перестройка свидетельствует о сенсибилизации организма к грибкам, являющихся постоянными сапрофитами слизистых оболочек и кожного покрова.
У больных с положительными реакциями агглютинации в более значительных разведениях сыворотки (от 1:120 до 1:480) при отсутствии других очагов грибковых заболеваний этот результат можно расценить как следствие грибкового процесса в ухе.
