Определение титра комплемента. Характеристика специфической иммунологической реактивности
Определение титра комплемента проводится путем колориметрического исследования гемолиза, развивающегося при взаимодействии взвеси эритроцитов барана, гемолитической сыворотки кролика и сыворотки больного (Л. С. Резникова, 1967).
Титр комплемента, по нашим данным, составляет у здоровых людей 0,062±0,004. У детей первых лет жизни и у пожилых количество комплемента меньше, чем у взрослых (М. Я. Студеникин, Т. С. Соколова, 1971, и др.).
В процессе внутриклеточного метаболизма и фагоцитоза значительную роль играют лизосомальные ферменты (кислая и щелочная фосфатаза), поэтому их содержание в лейкоцитах является одним из информативных показателей активности неспецифического адаптационного синдрома. Уменьшение активности указанных ферментов говорит о снижении неспецифической реактивности организма. Норма содержания щелочной и кислой фосфатаз соответственно равна (37,5±3,9) и (99,8±4,6) усл. ед.
На нейрогуморальные нарушения косвенно указывает отклонение в вегетативной обеспеченности иммунологических реакций, в связи с чем диагностически ценно определение содержания в крови ацетилхолина, холинэстеразы, серотонина, церуллоплазмина, моноаминоксидазы, а также экскреции катехоламинов, 17-КС, 17-ОКС и др. (А. М. Вейн с соавт., 1971).
Большое значение при решении вопроса о лечении больных с аутоиммунной патологией имеет оценка специфической иммунологической реактивности Следует иметь в виду, что нет какого-либо одного теста, характеризующего степень сенсибилизации и реактивность организма.
Характеристика специфической иммунологической реактивности. Специфические иммунологические реакции человека обеспечиваются за счет двух классов (В и Т) иммунокомпетентных клеток, взаимодействие которых (кооперация) осуществляется при участии макрофагов— А-клеток (Р. В. Петров, 1979).
В крови человека циркулирует 30—40 млрд. лимфоцитов. Из них 50—60% — Т-лимфоциты, 20—30% — В-лимфоциты и 10— 20%—«нулевые» лимфоциты. Ю. А. Малашхия (1974) в спинномозговой жидкости здоровых людей определил 71,2% Т-лимфоцитов, 9,1% В-лимфоцитов, 19,7% «нулевых» лимфоцитов. С возрастом число Т-лимфоцитов как в крови, так и в спинномозговой жидкости уменьшается.
Ю. А. Малашхия (1978) установил, что в организме человека помимо гемато-энцефалического (неспецифического защитного механизма) имеется иммунологический (специфический защитный) барьер мозга, находящийся в спинномозговой жидкости и функционирующий за счет Т- и В-лимфоцитов, а также иммуноглобулинов различных классов.
Оценка В-системы иммунитета. Гуморальный иммунитет осуществляется системой В-лимфоцитов, образующихся в костном мозге и попадающих оттуда преимущественно в лимфатические фолликулы пейеровых бляшек, селезенки и лимфатические узлы. В-лимфоциты являются предшественниками плазматических клеток, активно секретирующих циркулирующие в крови антитела (иммуноглобулины А, М, G, D и Е).
Определение содержания антител в крови и ликворе важно для суждения о характере и стадии заболевания. Для функциональной оценки В-системы лимфоцитов определяют различные классы иммуноглобулинов (А, М, G, D), комплементарное розеткообразование клеток (ЕАС-РОК)» число лимфоцитов, несущих на мембране детерминанты иммуноглобулинов, окрашивают поверхностные иммуноглобулиновые рецепторы флуоресцирующими антисыворотками и т. д. (Д. К. Новиков, В. И. Новикова, 1979; Б. Блум, Ф. Глэйд, 1974, и др.). В клинической иммунологии наибольшее значение имеет определение иммуноглобулинов (антител) в сыворотке крови и ликворе, что проводится методом радиальной иммунодиффузии по Манчини с соавторами (1965).
Существо исследования заключается в том, что в агар с диспергированной моноспецифической антисывороткой вносят эталонную сыворотку крови человека с известным содержанием иммуноглобулинов и испытуемые сыворотки человека. При этом образуются кольца преципитации, диаметры которых прямо пропорциональны количеству внесенного антигена. Этот метод сложный и требует сравнительно большого количества антисывороток и агара. В связи с этим мы применяем метод Манчини в модификации S. Polowna с соавторами (1976). Эта модификация позволяет «улавливать» малые величины иммуноглобулинов, что особенно важно при исследовании спинномозговой жидкости.
Содержание иммуноглобулинов различных классов при использовании этого метода в периферической крови, по нашим данным, следующее Jg А— (1,97±0,12) г/л, Jg М— (1,19+0,05) г/л, Jg G — (14,63 ±0,35) г/л.
В спинномозговой жидкости у здоровых молодых доноров содержание иммуноглобулинов равно: А — 0,5+0,3; G — 7,8±2,2 (Ю. А. Малашхия, 1975). Иммуноглобулины М определяются в чрезвычайно малых количествах (J. Savory с соавт., 1973). Параллельное исследование иммуноглобулинов сыворотки крови и ликвора при нейроинфекционных заболеваниях может быть «индикатором функции гемато-энцефалического барьера» (Н. Eickoff, 1977).
Реакция комплементарного розеткообразования клеток основана на способности лимфоцитов фиксировать на своей поверхности специально обработанные эритроциты, образуя при этом как бы розетку. Норма ЕАС-РОК составляет (16,5±2,9)%. Низкий показатель ЕАС-РОК может говорить об истощении функциональной активности В-системы лимфоцитов к антителогенезу, а следовательно, и к специфической иммунологической защите.
