Исследуются мазки и толстые капли крови. В толстой капле в зависимости от ее толщины за один и тот же промежуток времени исследуется в 20—30 раз большее количество крови, чем в мазке.
Мазки должны быть тонкими, равномерными, не доходить ни до конца, ни до краев стекла. Мазки следует делать на чистых обезжиренных стекла шлифованным предметным стеклом со срезанными углами. При приготовлении толстой капли на предметное стекло наносят каплю кровн, которую распространяют углом предметного стекла или иглой до величины двухкопеечной монеты. Лучше сделать раньше толстый мазок крови и дать упасть одной — двум каплям кровн на свежий мазок до того как он высохнет; кровь растекается в правильный диск. Преимущество этого метода заключается в том, что форменные элементы крови, а также паразиты не травмируются. Надпись делается на мазке простым карандашом.
Мазки фиксируют спиртом метиловым — 3 минуты или этиловым — 10—15 минут или смесью Никифорова — 20 минут.
Толстые капли окрашиваются нефиксированными.
Окрашиваются препараты обычной краской Романовского — I капля краски на I мл воды в течение 40—45 минут.
Вода, которой разводят краску, должна быть нейтральной (рН 7,0) идя слабо щелочной (рН 7,2) реакции. При использовании разных серий краски Романовского приходится эмпирически устанавливать как ее концентрацию, так и продолжительность окраски.
Следует иметь в виду, что неопытный исследователь может принять за паразитов ряд других образований и посторонних загрязнений. Бляшки Биццоцеро, лежащие по отдельности или кучкой (особенно если они располагаются на эритроцитах), могут быть приняты за мерозоиты или морулы. Обломки лейкоцитов также могут имитировать паразитов. Образованиями, имитирующими паразитов, могут оказаться попавшие в препарат иавне различные микроорганизмы: грибки, водоросли, свободиоживущие простейшие, оказавшиеся на недостаточно чистом стекле, недостаточно продезинфицированном пальце, в застоявшейся воде, которой развели краску и т. д.
Малярия, приобретенная в естественных условиях, обозначается как спорозоитная инфекция. Малярийная инфекция может передаваться также кровью с паразитами — шизонтная инфекция — например при передаче возбудителей малярии от матери плоду через плаценту (в случае ее повреждении). Ребенок может заразиться от матери также во время акта родов. Заражение малярией может произойти при несоблюдении правил асептики при инъекциях или взятии кровн — введение шизонтов при пользовании иглами или шприцем, загрязненными кровью больных малярией, а также при гемотерапии и гемотрансфузии, когда людям вводится кровь доноров, содержащая паразитов.
При маляриотерапии прогрессивного паралича больному вводят кровь, содержащую плазмодиев трехдневной малярии, либо спорозоиты плазмодиев того же вида, с короткой инкубацией.
Течение спорозоитной и шизонтной инфекции P. vivax различно. Тип инкубации (короткая или длительная) при Спорозоитной инфекции зависит от штамма паразита. Шизонтная инфекция дает короткую инкубацию независимо от штамма. При прививке кровью штаммов с короткой инкубацией не наблюдается отдаленных рецидивов, характерных для зтих штаммов при заражении ими через комаров.
Показана обратная зависимость между числом введенных спорозоитов и длительностью инкубационного периода. Однако установлено, что при введении большого количества спорозоитов не удается сократить продолжительность инкубационного периода менее известного минимума — 7—8 суток при P. vivax, 5 суток при P. falciparum, что соответствует длительности преэритроцитарной тканевой шизогонии.
Развитие преэритроцитарных шизонтов проходит несинхронно, деление нх растягивается на некоторый срок. Мерозоиты отдельными партиями вы ходят в кровь. В результате в периферической крови в первые дни острой фазы инфекции наблюдается весьма, разнообразная паразитарная картина— наличие нескольких генераций паразитов, находящихся на разных стадиях развития, массовая меруляция которых происходит в разное время. Такое несинхронное развитие шизонтов сказывается на клинической картине инфекции — температурная кривая носит неправильный характер (инициальная лихорадка), не снижаясь до нормы.
Упорядочение синхронности развития паразитов и возникновение правильной ремиттирующен лихорадки может рассматриваться как показатель развивающегося на этом этапе инфекции приобретенного иммунитета.
