Трансплантация участка ткани из эмбриона перепела в эмбрион курицы (Nicole LeDouarin) - кратко с точки зрения эмбриологии
Основа. Принцип. Техника трансплантации перепела (описанная Nicole LeDouarin в 1969) используется, чтобы изучить миграцию клеток в течение эмбрионального развития. Участок ткани для исследования пересаживается из эмбриона перепела в эмбрион курицы.
Пересаженная ткань интегрируется без какой-либо реакции отторжения, в то время как цыпленок продолжает нормально развиваться. На парафиновых срезах клетки курицы и перепела можно отличить друг от друга с помощью реакции Фельгена. Ядра перепелиных клеток становятся отчетливо окрашенными, в то время как ядра клеток цыпленка кажутся более гомогенными.
А. Трансплантация перепел-курица (по LeDouarin). Б. Эксперименты по изучению развития периферической нервной системы
А. Трансплантация ткани эмбриона перепела. В типичном эксперименте, чтобы продемонстрировать миграцию клеток нервного гребня (А1), часть нервной трубки у эмбриона курицы на стадии сомитов удаляется до миграции клеток нервного гребня и заменяется участком ткани нервной трубки эмбриона перепела на той же стадии.
Операция выполняется на фенестрированном яйце через маленький разрез в желточной оболочке при помощи игл с вольфрамовыми нитями и маленьких стеклянных пипеток. Участок нервной трубки эмбриона перепела проходит нормальное развитие в эмбрионе курицы. Спустя 18 часов миграция клеток нервного гребня может наблюдаться на серийных срезах (А2).
Этот метод также используется, чтобы изучить миграционные движения клеток в зачатке конечности или при изучении происхождения мезодермы, он превосходит технику окрашивания, используемую обычно на эмбрионах амфибий или при маркировке трансплантов тимидином, так как такая маркировка не теряется при диффузии или дилюции во время деления клеток.
Б. Эксперименты по изучению развития периферической нервной системы:
1. Автономная нервная система. Происхождение нейронов автономных ганглиев может быть установлено путем систематической трансплантации частей нервной трубки из эмбриона перепела в эмбрион курицы и гистологическим исследованием получившихся химер перепела. - Ресничный нервный узел. Нейроны ресничного нервного узла развиваются из нервного гребня в области среднего мозга.
- Парасимпатическая система. Нейроны ганглиев блуждающего нерва и парасимпатических ганглиев вдоль желудочно-кишечного тракта развиваются из нервного гребня на уровне сомитов 1—7. Это соответствует сегментам происхождения блуждающего нерва. Ниже пупка парасимпатические нейроны появляются из нервного гребня, расположенного каудальнее 28-го сомита (крестцовая часть парасимпатической системы).
- Симпатическая система. Автономные нейроны в ганглиях симпатической нервной системы развиваются из нервного гребня ниже 5-го сомита. Хромаффинные клетки мозгового вещества надпочечников образуются из сомитов 18—24 нервного гребня.
Эксперименты показывают, что функциональная организация автономной нервной системы определяется уже во время миграции клеток нервного гребня.
2. Головные ганглии. Трансплантация головного нервного гребня, слухового пузырька или эпибранхиальных плакод из эмбриона перепела в эмбрион курицы позволяет определить часть нейронов в головных ганглиях, развивающихся из плакод (2а). Нейроны и глиальные клетки спинномозговых ганглиев возникают исключительно из нервного гребня (2б), тогда как сенсорные ганглии нервов глоточных дуг являются производными частично эпибранхиальных плакод.
