Продолжается разработка новых методов анализа ДНК, повышается чувствительность молекулярного анализа к всё большему числу моногенных заболеваний. Большинство молекулярных тестов представляет собой использование полимеразной цепной реакции (ПЦР). Она включает амплификацию специфических последовательностей ДНК для быстрого анализа малого объёма материала, что особенно важно при антенатальной диагностике.
Основная роль анализа ДНК при генетическом консультировании заключается в:
• подтверждении клинического диагноза;
• выявлении женщин-носителей Х-сцепленных заболеваний, например, мышечная дистрофия Дюшенна и Беккера, гемофилия А и В;
• выявлении носителя при аутосомно-рецессив-ном заболевании, например, MB;
• доклинической диагностике аутосомно-доми-нантных заболеваний, например, болезнь Ген-тингтона, дистрофическая миотония;
• антенатальной диагностике всё большего числа заболеваний, наследуемых по законам Менделя.
При анализе ДНК используют различные методики исследований.
• Анализ мутаций. Возрастает число заболеваний, при которых возможно напрямую выявить существующую мутацию, ставшую причиной заболевания. Это обеспечивает очень точные результаты для подтверждения диагноза при доклиническом и прогнозирующем анализе. Выявление мутации у больных лиц может быть очень длительным, но если однажды это было проведено, тестирование других родственников проходит обычно намного проще.
- Делеции — мутации в виде больших делеций обычно встречаются при целом ряде заболеваний, включающих мышечную дистрофию Дюшенна и Беккера, альфа-талассемию и недостаточность 21-гидроксилазы (врождённая гиперплазия надпочечников). Они сравнительно просто выявляются при анализе.
- Точечные мутации и малые делеции — легко могут быть выделены, если одна и та же мутация встречается при всех случаях заболевания, как при СКА. Однако для большинства заболеваний существует очень разный спектр мутаций. В Великобритании 78% больных MB имеют мутацию AF508, но выявлено более 900 других мутаций. Большинство лабораторий тестируют определённое число наиболее частых мутаций в конкретной данной популяции.
- Мутации с экспансией повторов тринуклеотидов — легко выявляются, поскольку мутация при определённом заболевании всегда одна и та же. Единственным различием является размер последовательности повторов, который можно определить по размеру фрагмента ДНК, содержащего повтор.
• Генетическая связь. Если недоступен анализ мутаций, можно использовать вариации последовательностей ДНК (маркеров), локализованных рядом или внутри патологического гена, для определения наследования этого гена в семье. Этот метод анализа требует подходящего состава семьи, и до предварительного анализа связей необходимо протестировать нескольких основных её членов для выявления соответствующих маркеров.
При многих аутосомно-доминантных заболеваниях начало приходится на подростковый или взрослый возраст, и при рождении клинические проявления могут быть неочевидными. Родственникам пациента могут понадобиться анализы для определения риска развития у них заболевания. Примеры включают дистрофическую миотонию, болезнь Гентингтона, аутосомно-доминантный поликистоз почек и нейрофиброматоз (НФ). Для оценки используют:
• тщательный осмотр пациентов группы риска, например развитие пятен цвета «кофе с молоком» и веснушчатой пигментации в подмышечной области;
• исследования, например УЗИ почек у пациентов группы риска аутосомно-доминантного поликистоза почек;
• анализ ДНК с использованием связанных маркёров или анализ мутаций.
Принято считать, что доклиническое обследование (например, на болезнь Гентингтона и дистрофическую миотонию) и обследование носителей (например, при MB) не следует проводить у здоровых детей, поскольку это ущемляет будущее право ребёнка выбирать, нужна ему эта информация или нет.
Доклиническое тестирование не следует проводить до тех пор, пока пациент не сможет дать информированное согласие.
