Цитология: методика получения мазка клеток в процессе митоза
Для получения клеток в процессе митоза можно применить два метода: прямой или прижизненный (Tjio и Whang) и косвенный или в пробирке — посредством клеточных культур (Moorhead) и микрокультур (Arakaki). Применяется преимущественно один вид метода, в зависимости от наличия митоза в подлежащей исследованию ткани.
В тех тканях, клетки которых не подвергаются митотическому делению прижизненно, стимулируется этот процесс созданием культуральных условий в пробирке, при наличии митогенных веществ вида фитогемагглютинина (ФГА) или без таковых.
Оба метода получения клеток в процессе митоза имеют свои преимущества и недостатки. Так, прямые методы отражают процессы, протекающие прижизненно, избегая влияние культуральных условий, которые могут вызвать некоторые хромосомные сдвиги (полиплоидизация, хроматидные разрывы).
При этом техника простая, не треурет специального оборудования и строго стерильного обращения. Однако в отдельных случаях получаемое число митозов оказывается недостаточным для исследования. Косвенные методы несут в себе искусственный компонент, который, в некоторых случаях, может создать артефакты.
Тем не менее в пробирке, путем изменения культуральных условий, таких как время инкубации, добавление митогенов можно создать разрастание определенного клеточного ряда. Так, цикл деления миелоидного ряда в пробирке протекает раньше (на сутки), чем лимфатического, максимум деления которого отмечается через 72—96 часов. Митогенные средства вида ФГЛ, необходимые для создания процесса митоза нормальных лимфоцитов Т видимо не влияют на деление бластических или других незрелых клеток миелоидного ряда.
В целях комплексного исследования какой-либо ткани рекомендуется, когда это возможно, одновременное использование методов обоего вида — прямых и косвенных.
