Тип наследования миодистрофий. Комбинированная диагностика аутосомно-рецессивных миодистрофий
Ведущее значение в дифференциальной диагностике аутосомно-рецессивных КПМД имеет определение типа наследования болезни, а также иммуногистохимический анализ биоптатов мышц с использованием антител к соответствующим белкам. У больных с саркогликанопатиями окраска на дистрофии остается нормальной; в то же время дефект любого из белков-саркогликанов обычно приводит к дезинтеграции всего саркогликанового комплекса и нарушению нормального окрашивания препарата при использовании антисаркогликановых антител [Ozawa E. et al., 1995].
Аналогичным образом другие молекулярные формы аутосомно-рецессивных мышечных дистрофий диагностируются с помощью выявления специфического белкового дефекта кальпаина-3 или дисферлина в мышечном препарате [Anderson L. et al, 1998; Matsuda C. et al., 1999]. После того как иммуногистохимический анализ позволил определить потенциальный ген-кандидат, может ставиться вопрос о проведении мутационного скрининга кодирующей области данного гена, обнаружении конкретных мутаций и проведении прямой ДНК-диагностики у лиц из группы риска [Beckmann J., Bushby К., 1996; Duggan D. et al, 1997; Bushby K., 1999].
Принимая во внимание большие размеры генов аутосомно-рецессивных КПМД и разнообразие описанных мутаций, прямая ДНК-диагностика этих заболеваний до сегодняшнего времени представляет серьезные трудности и может проводиться лишь в небольшом числе высокоспециализированных лабораторий.
В нашей стране впервые прямая ДНК-диагностика отдельных случаев аутосомно-рецессивных КПМД была проведена двумя группами исследователей - нейрогенетическим отделением НИИ неврологии РАМН в семье с КПМД2В и миопатией Миоши и сотрудниками Медико-генетического научного центра РАМН и Института молекулярной генетики РАН в семьях с КПМД2у1 [Липатова Н.Л. и др., 2000].
В достаточно больших информативных семьях предпочтительным подходом является косвенная ДНК-диагностика болезни (анализ генетического сцепления с одним из локусов на хромосомах 2, 4, 5, 9, 13, 15, 17 и 19) [Beckmann J., Bushby К., 1996; Weiler Т. et al., 1998; Bushby К., 1999].
Комбинированное использование методов белковой и генной диагностики позволило оценить сравнительную частоту конкретных форм аутосомно-рецессивных мышечных дистрофий: в большинстве изученных популяций мира не менее 40% больных с КПМД имеют первичную патологию кальпаина-3, около 10-25% больных страдают дисферлинопатиями и различными вариантами саркогликанопатий (из них чаще всего встречается КПМД2Д связанная с патологией а-саркогликана), тогда как все остальные формы аутосомно-рецессивных КПМД являются более редкими [Bushby К., 1999].
В отдельных популяциях эти цифры могут существенно различаться, причем знание о преобладании в той или иной популяции определенной молекулярной формы мышечной дистрофии (и даже определенной мутации) позволяет значительно упростить идентификацию повреждений в гене и проведение ДНК-диагностики в семьях соответствующего этнического происхождения.