В нескольких исследованиях в регенеративной эндодонтии использовали различные трансляционные методики, включая оценку клинических образцов, моделей органотипического корневого канала, моделей зуба, цельной культуры зубов и животных моделей.

Данные исследования играют решающую роль для обеспечения прочной научной основы для восстановительной эндодонтии, позволяя оптимизировать протокол лечения и разрабатывать новые стратегии лечения, такие как включение матриц и факторов роста в регенеративные процедуры. В одном исследовании было продемонстрировано, что в корневых сегментах человека, имплантированных подкожно иммунокомпрометированным мышам, можно генерировать новый дентин и пульпоподобную ткань.

В этом исследовании корневые сегменты имели одно из отверстий, запечатанных МТА, чтобы имитировать коронковую реставрацию регенеративных эндодонтических случаев. Пространство канала было заполнено либо SCAP, либо DPSC на PLGA-основе. Имплантаты изъяли 3 мес спустя и обработали для иммуногистохимического анализа. Результаты показали, что вокруг дентиновых стенок было обнаружено периферическое размещение дентиноподобного материала.

Новая минерализованная ткань была выстлана поляризованными клетками, экспрессирующими одонтобластические маркеры. Кроме того, дентиноподобная ткань была в значительной степени трубчатой и содержала клеточные включения, подобные гистологическому строению остеодентина. Важно отметить, клетки из сконструированной пульпы были положительными для митохондрий человека, что свидетельствует о том, что они возникли из имплантированных стволовых клеток человека, а не из хозяина (мыши).

Наконец, корневые сегменты, которые были имплантированы без стволовых клеток, имели только соединительную ткань, которая не напоминала пульпоподобную ткань, а также не имела минерализованных тканей и одонтобластоподобных клеток. Таким образом, дентино-пульпарный комплекс может быть сконструирован в корнях человека, имплантированных подкожно иммунодефицитным мышам.

Накашима (Nakashima) и соавт. достигли полной регенерации пульпы у собак. В этом исследовании пульпа была удалена путем стерильной пульпэктомии с последующим размещением отсортированных CD105 + DPSC в коллагеновом геле до середины корня. Оставшаяся корональная часть канала была заполнена коллагеновым гелем, содержащим хемотаксический фактор стромального производного фактора 1 (SDF-1).

Последующее гистологическое исследование выявило формирование новой пульпарной ткани с иннервацией, васкуляризацией и одонтобластоподобными клетками, выстилающими стенки дентина. Кроме того, сконструированная пульпа имела экспрессию белка и РНК, подобную естественной пульпе зуба. В другом важном исследовании мобилизованные DPSC были получены путем выбора DPSC, которые мигрировали по градиенту концентрации колониестимулирующего фактора гранулоцитов (G-CSF). Эти отобранные клетки в коллагеновом геле были имплантированы в корневые каналы после проведения пульпэктомии.

Наблюдалась полная регенерация пульпы: появление новообразованного дентина, кровеносных сосудов и иннервации в искусственной ткани (рис. ниже). Впечатляющие результаты такого клеточного подхода заложили основу для использования этой технологии в новых клинических испытаниях. Стоит отметить, что все случаи регенерации пульпы на животных моделях произошли в корневых каналах без инфекции и некроза пульпы в анамнезе. Ранее инфицированные корневые каналы должны быть надлежащим образом дезинфицированы, чтобы подавить хроническое течение, которое негативно влияет на регенерацию.

Однако многие ирриганты и медикаменты оказывают пагубное влияние на выживание и дифференцировку стволовых клеток. В нескольких исследованиях, в которых использовали органотипические модели корневых каналов и модели животных, оценивали комбинации и концентрации ирригантов и медикаментов, при которых возможна пролиферация и дифференцировка стволовых клеток. Таким образом, адекватная дезинфекция и устранение воспаления, по-видимому, являются ограничивающими факторами в процессе регенерации пульпы, несмотря на захватывающие результаты современных достижений в области создания искусственной пульпарной ткани зуба.

а) Обзор основных исследований по восстановительной эндодонтии. Регенерация функционального дентино-пульпарного комплекса основана на принципах тканевой инженерии и может рассматриваться как функция правильной доставки в пространственном отношении соответствующих стволовых клеток и факторов роста, встроенных в матрицу.

Несмотря на то что во множестве исследований использовали методы клеточной культуры in vitro для выявления ключевых факторов, регулирующих дифференцировку одонтобластоподобных клеток, новые исследования, проведенные на животных моделях, перспективны для регенерации этой пульпарной ткани. В доклинических исследованиях, включавших хирургическое внесение человеческого зуба, заполненного комбинацией человеческих стволовых клеток, факторов роста и матрицей, в мышей с ослабленным иммунитетом, при гистологическом исследовании выявили неоваскуляризацию, а также дифференцировку и минерализационную активность новообразованных одонтобластов.

Использование человеческих клеток в модели мыши гистологически обусловлено тем, что полученные в результате одонтобластоподобные клетки человеческого происхождения. Такие новые результаты являются убедительными доказательствами того, что человеческие SCAP либо источники DPSC-клеток на PLAS-матрице были способны регенерировать васкуляризированную ткань, которая имела гистологические признаки дифференциации одонтобластоподобных клеток, и пространственное образование дентиноподобного материала на стенках корневого канала. Хотя к этой смеси не были добавлены конкретные факторы роста, важно отметить, что стенки корневых каналов обрабатывались 17% ЭДТА, веществом, которое, как известно, способствует высвобождению эндогенных факторов роста, встроенных в стенки дентина. Данное и другие аналогичные исследования дают мощный импульс для клинических трансляционных исследований, оценивающих различные потенциальные регенеративные варианты эндодонтического лечения.

- Также рекомендуем "Современные процедуры применяемые в регенеративной эндодонтии"

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 3.5.2023