Техника забора материала для бакпосева с глаз. Методы исследования глазных мазков
При заборе клинического материала от больного и при последующей работе с ним необходимо помнить о потенциальной опасности любых биологических материалов, полученных от инфекционных больных. Использование защитной спецодежды, как минимум, перчаток и халата, а в случае возможности возникновения аэрозолей — защитных очков или масок, является обязательным. Направляемый на исследование заразный материал должен быть соответствующим образом упакован для предотвращения заражения окружающих и контаминации самого материала посторонними биологическими агентами. На каждую пробу, направляемую в лабораторию, заполняется соответствующее направление.
При определении перечня необходимых лабораторных исследований учитывают необходимость этиологической расшифровки диагноза и установления ведущих патогенетических звеньев данного заболевания, а также предполагаемый дифференциальный диагноз.
Забор клинического материала следует производить до назначения антимикробных (антибактериальных или противовирусных) препаратов. Основное внимание необходимо обратить на получение материала из основного очага локализации предполагаемого возбудителя. Кратность проведения исследования зависит от метода исследования, сроков забора материала, особенностей заболевания и т. д. Количество клинического материала определяется выбором методов исследования и разумной достаточностью, поскольку недостаточное количество материала может определять ложноотрицательный результат.
При взятии материала приготавливают мазки для первичной бактериоскопии и производят высевы на сывороточный и тиогликолевый бульоны (2 пробирки). Мазки высушивают, стекло маркируют. Нативный материал (тампон с материалом в пробирке) и посевы доставляют в лабораторию для дальнейшего бактериологического исследования.
Методы исследования глазных мазков
Проведение традиционных бактериологических исследований при инфекционных поражениях глаз не отличается от аналогичных исследований при бактериальных инфекциях другой локализации.
Для диагностики вирусных инфекций наряду с традиционными иммунологическими исследованиями с целью обнаружения специфических антител чаще всего используют метод флюоресцирующих антител. Материалом для исследования являются соскобы конъюнктивы или эпителия роговицы.
Вирусный антиген обнаруживается в соскобах эпителия конъюнктивы и роговицы больного глаза при поверхностных и глубоких кератитах, при иридоциклитах. Специфическое свечение в ряде случаев может выявляться даже у реконвалесцентов, перенесших вирусную инфекцию с поражением глаз.
В повседневной практике применяют как прямой, так и непрямой метод флюоресцирующих антител. Непрямой метод не уступает прямому в частоте выявления вирусного антигена, однако при нем фоновое свечение и неспецифическая флюоресценция выражены сильнее, что затрудняет оценку результатов. Использование специфических антител позволяет проводить серотипирование возбудителя без выделения самого вируса.
Еще одним методом диагностики вирусных поражений органа зрения является традиционная реакция непрямой гемагглю-тинации. В качестве метода экспресс-диагностики она может быть использована, например, для диагностики герпетических поражений глаза, особенно на поздних этапах заболевания. Для анализа получают небольшое количество слезной жидкости, в которой определяют наличие антигена вируса герпеса. Для РНГА используют герпетический гамма-глобулиновый эритроцитарный диагностикум.
Метод выделения вируса может быть использован только при наличии специальной вирусологической лаборатории. Он дорогостоящ, занимает достаточно длительное время и требует высокой квалификации специалистов. В качестве исходного материала могут использоваться смывы с конъюнктивы, соскобы с конъюнктивы и роговицы, мазки-отпечатки и т. д.
Цитологический метод исследования глазных мазков. Исследование фиксированных и окрашенных соскобов конъюнктивы и роговицы может служить вспомогательным методом в диагностике вирусных поражений глаз. Одновременно отмечается усиление амитотического деления эпителиальных клеток и появление многоядерных клеток. При этом регулярно отмечаются базофилия их цитоплазмы, наличие внеклеточного детрита. Внутриядерные включения были описаны в роговичных соскобах кроликов, зараженных вирусом простого герпеса.
Определенные трудности связаны с диагностикой паразитарных заболеваний глаза. Так, при онхоцеркозе используют обнаружение микрофилярий в срезах кожи, в тканях и средах глаза, в моче и крови. Выявление паразитов в глазу позволяет установить диагноз и оценить тяжесть поражения органа зрения и при других паразитарных заболеваниях. Для диагностики ряда паразитарных инвазий применяют внутрикожные пробы (лоаоз и др.).
Серологические методы исследования глазных мазков позволяют выявить в сыворотке крови специфические антитела. Определенное диагностическое и прогностическое значение имеет изучение иммуноглобулинов в слезной жидкости.
В большинстве случаев диагностика инфекционных поражений органа зрения проводится в соответствии с рекомендациями, приведенными в указаниях и рекомендациях по диагностике той или иной конкретной инфекции с обязательными дополнительными исследованиями биологических материалов, полученных при проведении осмотра пораженного глаза.
