Криоконсервирование и хранение гемопоэтических стволовых клеток
Для криоконсервирования концентратов периферических стволовых клеток крови (ПСКК) в клинических условиях используют методы, разработанные для клеток костного мозга. Основные отличия трансплантата из периферических стволовых клеток крови от костного мозга заключаются в большей концентрации клеток, полученных после мобилизации цитокинами, увеличенном содержании более дифференцированных клеток и отсутствии жира.
Этап фракционирования обычно ограничивается уменьшением объема концентрата путем его центрифугирования. В качестве криопротектора используют раствор диметилсульфоксида (ДМСО), часто с добавлением гидроксиэтилкрахмала (ГЭК) и последующим программным или непрограммным замораживанием.
Механизм криозащитного действия криопротектора связан с его способностью соединять молекулы воды, что приводит к замедлению вовлечения их в растущие кристаллы, а это в свою очередь препятствует быстрому нарастанию осмолярности среды и снижает осмотическую нагрузку на клетки. При программном замораживании скорость охлаждения 1—3 °С/мин до окончания этапа кристаллизации считается оптимальной.
Хранить замороженные гемопоэтические стволовые клетки можно в низкотемпературной холодильной установке при температуре от —85 °С до 6 мес. Длительное хранение гемопоэтических стволовых клеток, в течение нескольких лет, рекомендуется при температуре ниже -120 °С, как правило до -196 °С, в жидком азоте или его парах.
Размораживание гемопоэтических стволовых клеток производят максимально быстро на водяной бане при температуре 41 °С.