Клинический анализ крови при хроническом лимфолейкозе. Первым лабораторным признаком заболевания является лейкоцитоз с относительным и абсолютным лимфоцитозом. Морфологически лимфоциты не отличаются от нормальных. Пролимфоцитов обычно не более 2%.
Имеется редкий вариант хронического лимфолейкоза, при котором пролимфоцитов больше 10%, но меньше 55% (при количестве пролимфоцитов больше 55% диагностируется пролимфоцитарный лейкоз). Течение этого варианта заболевания значительно более агрессивное и приближается к пролимфоцитарному лейкозу.
Закономерно обнаруживаются тени Гумпрехта — разрушенные ядра лейкемически измененных лимфоцитов (артефакт, образующийся при приготовлении мазка крови). При прогрессировании нарастают лейкоцитоз и лимфоцитоз, анемия и тромбоцитопения. Анемия и тромбоцитопе-ния могут иметь аутоиммунный характер, что подтверждается обнаружением антител и положительным ответом на глюкокортикостероиды.
Исследование костного мозга при хроническом лимфолейкозе. Диагностическое значение имеют обнаружение более 30% лимфоцитов в миелограмме (если аспират не разведен периферической кровью) и лимфоидная инфильтрация костного мозга по данным трепанобиопсии. Характер инфильтрации костного мозга имеет прогностическое значение: нодулярное и интерстициальное поражение более благоприятно, чем диффузное.
Биохимические и иммунологигеские исследования при хроническом лимфолейкозе. При хроническом лимфолейкозе отсутствуют патогномоничные изменения биохимических показателей. В то же время характерны увеличение содержания мочевой кислоты (при лейкоцитозе), общей ЛДГ (отражает объем опухолевой массы и является неблагоприятным прогностическим признаком), а также гипогаммаглобулинемия, коррелирующая с частотой инфекционных осложнений.
У большинства пациентов обнаруживается снижение уровня иммуноглобулинов G, М и А. Чрезвычайно большое значение для диагностики и дифференциального диагноза имеет определение иммунофенотипа. Характерный иммунофенотип при В-клеточном ХЛЛ: CD5+, CD19+, CD20+, CD22± , CD79a+, CD23+, CD43+, CDllct, CD10-, циклин D1-. Как правило, негативны FMC7 и CD79b.
При проведении иммунофенотипирования рекомендуется оценивать экспрессию CD38, ZAP-70 и CD52. Экспрессия CD38 и/или ZAP-70 коррелирует с выявлением «u-CLL» и является плохим прогностическим признаком. Маркер CD52 — «мишень» для лечения моноклональным анти-CD52 антителом (Campath-1).
Цитогенетические и молекулярно-генетические исследования при хроническом лимфолейкозе. При рутинном цитогенетическом исследовании изменения кариотипа обнаруживаются более чем у 50% больных ХЛЛ, при FISH-анализе — у 80%. К наиболее частым аномалиям относятся трисомия хромосомы 12 (20% случаев), делеция хромосом llq (20%), 13q и 14q (50%), 6q21 (5%) или 17р13 (локус р53 — 10% случаев). При изменениях кариотипа, особенно множественных, прогноз заболевания ухудшается.
Выявлены ассоциации между хромосомными транслокациями и онкогенами, имеющими значение в лейкозогенезе: t(ll; 14) — с BCL-1 (следует отметить, что гиперэкспрессия BCL-1 чаще наблюдается при лимфоме мантийной зоны); t (14; 18) — с BCL-2 (экспрессия гена BCL-2, который препятствует развитию апоптоза, нарастает по мере прогрессирования ХЛЛ). Как уже отмечалось, мутация гена р53, которая выявляется у 10% пациентов, имеет неблагоприятное прогностическое значение.
Диагноз В-клеточного хронического лимфолейкоза правомочен при наличии следующих признаков:
1) абсолютный лимфоцитоз периферической крови более 10 • 109/л;
2) при световой микроскопии лимфоциты имеют нормальную морфологию (меньше 10% атипичных лимфоцитов);
3) характерный иммунофенотип;
4) лимфоцитарная инфильтрация костного мозга (более 30% лимфоцитов при исследовании миелограммы, лимфоидная метаплазия костного мозга в трепанобиоптате).
Дифференциальный диагноз проводится с заболеваниями, сопровождающимися лимфаденопатией и лимфоцитозом. К ним относятся другие лимфопролиферативные заболевания (неходжкинские лимфомы, волосатоклеточный лейкоз), вирусные (краснуха, корь, цитомегаловирус, ВИЧ-инфекция, герпес, инфекционный мононуклеоз) и некоторые бактериальные инфекции (токсоплазмоз, туберкулез).
Клиническая картина при реактивных и опухолевых лимфаденопатиях и лимфоцитозах не имеет решающего значения для диагностики, однако следует учитывать ряд гематологических показателей (во всех случаях отсутствуют тени Гумпрехта, при вирусных инфекциях возможно появление небольшого количества плазматических клеток, для неходжкинских лимфом и волосатоклеточного лейкоза характерен полиморфизм лимфоцитов и другой иммунофенотип).
Проведение дифференциальной диагностики и постановка окончательного диагноза хронического лимфолейкоза основаны на результатах гистологического исследования лимфатического узла и трепанобиосии костного мозга, анализа миелограммы, иммунофенотипа лимфоцитов, данных серологических и культуральных исследований (для исключения инфекционных заболеваний).
