Болезнь Альцгеймера. Семейные формы болезни Альцгеймера
Болезнь Альцгеймера представляет собой одно из наиболее частых нейродегенеративных заболеваний человека и ведущую причину деменции в современном обществе [Rocca W. et al., 1991; Schellenberg G., 1995]. Ее распространенность у лиц старше 65 лет составляет около 3% и неуклонно повышается в более пожилых возрастных группах [Katzman R., 1976]. На секции выявляется диффузная атрофия мозга, с большей выраженостью изменений в теменных и затылочных областях.
При микроскопическом исследовании обнаруживаются два основных гистологических признака болезни Альцгеймера: 1) амилоидные (сенильные) бляшки в паренхиме мозга, главным компонентом которых являются фибриллярные агрегаты гидрофобного пептида (3-амилоида, состоящего из 39-43 аминокислот; 2) нейрофибриллярные клубки, представляющие собой спаянные попарно скрученные филаменты измененных нейронов, легко выявляемые при импрегнации серебром [McKee A. et al., 1991]. Характерно также выпадение нейронов, глиоз, наличие единичных телец Леви. Отмеченные изменения наиболее выражены в коре больших полушарий и гиппокампе.
Интересно отметить, что мутация Glu693Gln в 17-м экзоне гена АРР приводит к развитию другого заболевания с близким патогенезом - так называемого наследственного церебрального кровоизлияния голландского типа, обусловленного изменением стенок церебральных сосудов вследствие отложения в них амилоидных депозитов [Levy E. et al., 1990]. Более того, оба АРР-ассоциированных заболевания (деменция альцгеймеровского типа и церебральное кровоизлияние) могут наблюдаться у различных родственников в одной и той же родословной -как это описано в семье с мутацией Gly692Ala в 17-м экзоне гена АРР [Hendriks L. et al., 1992].
Принимая во внимание, что аутосомно-доминантные формы болезни Альцгеймера характеризуются чаще всего ранним началом заболевания, с практической точки зрения мутационный скрининг целесообразно ограничивать семьями, в которых хотя бы у части родственников симптомы болезни манифестировали до 60 лет. Правильному выбору гена, подлежащего исследованию, может способствовать предварительное установление сцепления болезни с одним из известных локусов на хромосомах lq, 14q или 21q. Если такой анализ сцепления невозможен ввиду небольшого размера обследуемых семей, мутационный анализ генов проводится в следующей последовательности: пресенилин-1, АРР, пресенилин-2 (в соответствии с частотой встречаемости мутаций в данных генах).
Поиск мутаций в пресенилипах проводится как на геномной ДНК (SSCP-анализ + прямое секвснирование отдельных экзонов), так и на ДНК из лимфоцитов крови, которая амплифицируется в виде полного набора перекрывающихся фрагментов и подвергается тотальному секвенированию. Для ДНК-диагностики мутаций в гене АРР обычно избирательно секвенируются 16-й и 17-й экзоны гена, кодирующие структуру основного патогеннного продукта белка АРР - пептида А(3. При исключении мутаций в исследованных областях всех указанных генов некоторые авторы рекомендуют также секвенировать экзоны 7, 8 и 18 гена АРР, соответствующие функционально значимым участкам АРР-белка.
По данным разных авторов, изучавших различные популяции и выборки больных с ранними аутосомно-доминантными случаями болезни Альцгеймера, общая частота выявления мутаций в генах АРР и пресенилинов варьирует от 18% до 100% [Hutton ML, Hardy J., 1997; Cruts M. et al., 1998; Campion D. et al., 1999]. Поскольку даже в семьях с подтвержденным сцеплением секвени-рование может не выявлять нарушений нуклеотидного состава кодирующей части гена (это возможно при локализации мутаций в интронах, промоторной области и др.), в таких семьях доступным методом молекулярной диагностики может служить косвенная ДНК-диагностика с использованием маркеров мутантного хромосомного локуса.
