МедУнивер - MedUniver.com Все разделы сайта Видео по медицине Книги по медицине Форум консультаций врачей  
Рекомендуем:
Гинекология:
Гинекология
Бесплодие в гинекологии
Детская гинекология
Диагностика в гинекологии
Онкогинекология
Операции в гинекологии
Советы гинеколога
Книги по гинекологии
Видео по гинекологии
Форум
 

Техника взятия влагалищного мазка. Методы окрашивания мазка

Содержимое заднего свода влагалища для исследования берут браншей пинцета, узким деревянным шпателем или стеклянной пипеткей длиной 20 см, диаметром 5—7 мм с изогнутым дистальным концом и резиновым баллоном на проксимальном конце. Так как особенности влагалищного содержимого могут быть различными в зависимости от длительности пребывания во влагалище и особенностей его моторной функции, рекомендуется за 2 дня до взятия мазка механически очистить влагалище от содержимого и воздерживаться от влагалищных манипуляций и половых сношений. У девственниц содержимое влагалища берут проволочной петлей через ушное или носовое зеркало или с помощью детского вагиноскопа.

Предметные стекла для влагалищных мазков должны быть предварительно обезжирены. Мазок делают с помощью шлифопанного стекла. Он должен быть тонким. При скудном содержимом влагалища насасывают в пипетку до взятия мазка каплю изотонического раствора хлорида натрия и разведенные выделения наносят на стекло. Мазок фиксируют по влажном состоянии в течение 15 мин смесью 96% этилового спирта и диэтилового эфира (1 : 1). Мазок может оставаться в фиксирующем растворе в течение 15 дней.

При подготовке влагалищного мазка для полихромной окраски рН фиксирующего раствора снижают с 6,9—7 до 5,6—6, что способствует большей восприимчивости клеток к ацидофильной окраске. Для этого мазок фиксируют смесью из изопропилового спирта (97,5 части) и ледяной уксусной кислоты (2,5 части).

1. Упрощенный метод окраски. Высушенный на воздухе мазок окрашивают 1 % раствором метиленового синего в течение 2 мин или раствором фуксина (3 г фуксина+96 мл абсолютного спирта) в течение 1 мин. Краску смывают проточной водой и мазок высушивают.

2. Окраска гематоксилин-эозином. Фиксированный в смеси спирта с эфиром мазок окрашивают в течение 15 мин в растворе гематоксилина, смывают краску водой, окрашивают на протяжении 3—5 мин эозином и повторно смывают водой. Для обесцвечивания ядер мазок проводят последовательно через 70% (5 мин), 95% (5 мин) и 100% (8 мин) спирт, высушивают, помещают на 15 мин в ксилол и заключают в канадский бальзам.

3. Полихромная окраска. Применяются три краски — гематоксилин для окрашивания ядер клеток влагалищного эпителия, оранж 0,6 (ацидофильная) и зелень лихтгрюн Lumiere EA-31 (базофильная).

влагалищный мазок

Фиксированный мазок проводят последовательно через 70% и 50% спирт, погружают в дистиллированную воду, окрашивают в течение 5— 10 мин гематоксилином. Промывают в дистиллированной воде, 4—5 раз в 0,5% водном растворе НСl, а затем проточной водой. На 1 мин мазок погружают в карбонат кальция (3 капли насыщенного водного раствора на 100 мл воды) и проводят последовательно через 50%, 70%, 80% и 95% спирт, в течение 3—4 мин окрашивают оранжем, проводят дважды через 95% спирт, погружают на 10—15 мин в краску ЕА-31, затем в 95% и абсолютный спирт и заключают в канадский бальзам.

Ядра влагалищных клеток окрашиваются интенсивно в светло-синие, темно-пурпурные тона, цитоплазма базофильных клеток — в голубовато-зеленоватые тона, цитоплазма ацидофильных клеток — в желтовато-оранжевые, розовато-красные тона.

Влажный фиксированный мазок окрашивают специальным сложным составом из ряда красок в течение 2 мин. Последовательно проводят мазок через 70%, 90% и абсолютный спирт, помещают в ксилол и заключают в канадский бальзам.

Состав краски: а) этилового спирта 100 мл, шарлаха бибиховского 0,5 г, оранжа 0,25 г, зеленой 0,075 г, фосфорно-молибденовой кислоты 0,5 мл, фосфорно-вольфрамовой кислоты 0,5 мл, ледяной уксусной кислоты 1 мл;

б) фосфорно-вольфрамовой кислоты 0,5 мл, фосфорно-молибденовой кислоты 0,5 мл, ледяной уксусной кислоты 1 мл, эритрозина 0,5 г, бриллиантового зеленого 0,075 г, 20% водного раствора анилинового синего 20 мл, 60% спирта 80 мл.
Окраска цитоплазмы и ядер клеток аналогична окраске по методу Паваниколау.

Комбинация приведенных выше методов окраски. Фиксированный мазок на 2—4 мин помещают в приготовленный полихромный протоплазменный краситель, затем последовательно помещают в 75% и 95% спирт и ксилол. Высушивают и заключают в кедровое масло.

Состав краски: оранжа 0,100 г, эритрозина 0,250 г, лихтгрюна 0,200 г, фосфорно-молибденовой кислоты 0,200 г, фосфорно-вольфрамовой кислоты 0,200 г, ледяной уксусной кислоты 1 г, 50% спирта 100 мл. Для приготовления краски 50% спирт разделяют на три равные части, в каждой из них растворяют отдельно оранж, лихтгрюн и эритрозин. После полного растворения каждой краски все смешивают и добавляют остальные реактивы.
Цитоплазма базофильных клеток окрашивается в светло-зеленые тона, ацидофильных — в золотисто-розовые.

Для лучшего прокрашивания ядер способ окраски несколько видоизменяют. Фиксированный мазок окрашивают гематоксилином в течение 1 мин, промывают проточной водой, после чего в течение 2—4 мин окрашивают описанным выше способом полихромным красителем.

Фиксированный одним из описанных выше способов мазок промывают в течение 2 мин в дистиллированной воде, окрашивают в течение 1—3 мин гематоксилином, промывают в течение 4—10 мин проточной водой, на 2 мин помещают в смесь из 70% изопропилового спирта с 2,5% уксусной кислоты; окрашивают по второму способу, промывают и снова помещают на 2 мин в смесь изопропилового спирта с уксусной кислотой (2,5%), на 2 мин в изопропиловый спирт, на 2 мин в ксилол и заключают в канадский бальзам.

- Также рекомендуем "Окраска мазка крезиловым фиолетовым. Клетки влагалищного мазка в норме"

Оглавление темы "Исследования при нарушении менструального цикла":
  1. Нейрогуморальные причины менструальных нарушений. Дисменорея и альгоменорея
  2. Какие обследования нужны при нарушении менструального цикла? Исследование гормонов
  3. Женские половые гормоны в норме. Гормональная активность яичников
  4. Норма андрогенов в женском организме. Значение определения гормонов в гинекологии
  5. Какая в норме базальная температура? - Методика измерения
  6. Что исследуют после выскабливания матки? Оценка соскоба эндометрия
  7. Что исследуют во влагалищном мазке? Норма цитологии мазка
  8. Техника взятия влагалищного мазка. Методы окрашивания мазка
  9. Окраска мазка крезиловым фиолетовым. Клетки влагалищного мазка в норме
  10. Реакции влагалищного мазка. Кариопикнотический индекс (КПИ), индекс созревания (ИС)
Медунивер Мы в Telegram Мы в YouTube Мы в VK Форум консультаций врачей Контакты, реклама
Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.