Оценка ферментообразующей функции желудка. Методы определения ферментообразуюшей функции
Ферментообразующая функция желудка определяется на основании дебит-час пепсина в желудочном содержимом Используются разные методики для оценки ферментообразуюшей функции, наиболее распространены следующие.
1. Метод Туголукова - основывается на изучении протеолитического действия пепсина в пробирке: по количеству переваренного белкового субстрата (яичного белка) судят о количестве пепсина в биологическом материале У здоровых детей школьного возраста концентрация пелсина в желудочном содержимом составляет натощак в среднем 44±7 г/л, в базальном секрете - 49±8 г/л, в стимулированном - 51 ±9 г/л.
2. Метод Пятницкого - основан на способности ферментов желудочного сока осаждать казеин молока Результаты исследования выражаются в условных единицах пелсина (одна единица соответствует 0,01 мг чистого пелсина).
3. Метод Уэста-Эллисэ и Скотта - основан на определении уропепсиногена по створаживанию молочно-ацетатной смеси. Результаты исследования выражаются в условных единицах.
4. Метод определения суммарной переваривающей активности желудочного содержимого. Этот метод достаточно прост, обладает высокой эффективностью и рекомендуется для использования в педиатрической практике.
Флакон фибриногена (1 г) растворить в 100 мл физиологического раствора (в готовом виде раствор хранению не подлежит) К 10 мл полученного раствора фибриногена добавить 0,2-0,3 мл раствора тромбина с активностью 10-12 с, и смесь перенести в пластмассовую чашку Петри, установленную на строго горизонтальную поверхность (поверхность проверяется по уровнемеру). Образовавшуюся на дне чашки Петри фибриновую пленку прогреть в сушильном шкафу в течение 25-30 мин при температуре +80-85 С (чашки Петри с фибриноеой пленкой в горизонтальном положении можно хранить в герметичном сосуде в холодильнике не более 7-10 дней)
На исследуемую чашку нанести 0,1 мл исследуемого желудочного содержимого и поместить в термостат при +37°С на 1 ч. После часового инкубирования вычислить площадь лротеолиза и количество (дебит-час) переваренного фибрина.
Ход расчета. Площадь дна чашки Петри высчитывается по формуле: S= px(d/2)2, где S - площадь дна чашки Петри, p - 3,14; d - диаметр дна чашки Петри,
Фибриновая пленка содержит 100 мг фибрина, т.е. на 1 мм2 приходится 100 мг/5 фибрина Чашку Петри положить на линейку и измерить диаметр участка протеолиза в двух взаимно перпендикулярных направлениях, найти среднюю величину диаметра и по вышеприведенной формуле определить площадь протеолиза Далее остается высчитать какое количество фибрина было переварено, умножив на рассчитанный ранее коэффициент в 1 мм2 Полученные значения просуммировать для всех порций сока и умножить на общее количество сока за 1 ч. Расчет дебит-часа переваривающей способности вести для баэальной и стимулированной секреции.
У здоровых детей нормальные показатели составляют: базальная фаза - 390-540 мг/ч, стимулированная фаза - 900-1200 мг/ч.