Генетика
  Домой Медицинский фото атлас Психология отношений Медицинские видео ролики Медицинская библиотека Консультация врача  
Генетика:
Генетика
Аномалии хромосом
Биология клетки
Генетика врожденных пороков
Генетика рака - опухолей
Молекулярная генетика
Цитогенетика - исследование хромосом
Лечение наследственных болезней
Фармакогенетика
Рекомендуем:
Необходимое:
Книги по медицине
Видео по медицине
Фотографии по медицине
Консультации врачей
Форум
 

Аллель-специфичные олигонуклеотидные зонды в молекулярной генетике. Особенности

При некоторых генетических болезнях одна и та же мутация ответственна за значимую долю случаев. Это, например, мутация, вызывающая серповидноклеточную анемию, изменяющая единственный нуклеотид и приводящая к замене глутаминовой кислоты на валин в молекуле бета-глобина, или трехнуклеотидная делеция в гене трансмембранного белка-переносчика при муковисцидозе, составляющая до 60% всех случаев тяжелых форм муковисцидоза у европеоидов.

В других случаях приходится искать редкую мутацию у члена семьи, в которой она уже была выявлена ранее. В перечисленных ситуациях можно провести прицельный анализ ДНК на наличие или отсутствие конкретной мутации у пациента. Лучший зонд для обнаружения однонуклеотидной мутации или небольшой делеции или инсерции — синтетический олигонуклеотид, поскольку небольшая длина делает его чувствительным даже к единичным несовпадениям нуклеотидных пар между зондом и анализируемым образцом.

Олигонуклеотидный зонд, синтезированный в точном соответствии с нормальной последовательностью ДНК гена [аллель-специфический олигонуклеотид (АСО)], гибридизируется только с нормальной комплементарной последовательностью, и никогда — с последовательностью, в которой есть хотя бы одно несовпадение с зондом. Аналогично аллель-специфичный олигонуклетидный-зонд, комплементарный к последовательности мутантного гена, гибридизируется только с ним, а не с нормальным геном.

аллель-специфичные олигонуклеотидные зонды

Важно понимать различие между аллель-специфичным олигонуклетидным-анализом и стандартным анализом по Саузерну. В большинстве случаев при использовании стандартных зондов в Саузерн-блоттинге мутантные гены с одно-нуклеотидными заменами или другими «малыми» мутациями ДНК (например, небольшими делениями или инсерциями) неотличимы от нормальных.
Только короткие аллель-специфичные олигонуклеотидные зонды способны надежно обнаруживать однонуклеотидные замены.

Аллель-специфичный олигонуклеотидный-анализ позволяет провести точную идентификацию конкретной последовательности ДНК и различать индивидуумов, несущих нормальную последовательность ДНК в гомологичных хромосомах, мутантную последовательность как в гомологичных хромосомах, так и в одной хромосоме при нормальной последовательности в другом гомологе.

Тем не менее в ходе интерпретации результатов аллель-специфичного олигонуклетидного-анализа необходима осторожность, поскольку не все мутантные гены в одном локусе несут одинаковые изменения последовательности ДНК. Таким образом, отсутствие гибридизации гена со специфическим мутантным АСО-зондом не обязательно означает, что этот ген нормален; возможна мутация в позиции, не проверяемой конкретным аллель-специфичным олигонуклетидным зондом.

- Читать далее "Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Особенности"


Оглавление темы "Молекулярная генетика":
  1. Ферменты рестрикции. Применение в молекулярной генетике
  2. Векторы, плазмиды в молекулярной генетике. Что такое вектор, плазмида?
  3. Библиотеки в молекулярной генетике. Что такое библиотека?
  4. Скрининг библиотек гибридизационными зондами в молекулярной генетике. Особенности
  5. Саузерн-блоттинг в молекулярной генетике. Особенности
  6. Аллель-специфичные олигонуклеотидные зонды в молекулярной генетике. Особенности
  7. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Особенности
  8. Молекулярный анализ мутаций у человека. Рекомендации
  9. Анализ последовательности ДНК. Особенности
  10. Методы анализа изображений флюоресцентно меченных нуклеотидов. Особенности
Загрузка...

   
MedUniver.com
ICQ:493-344-927
E-mail: reklama@meduniver.com
   

Пользователи интересуются:

Будем рады вашим вопросам и отзывам:

Полная версия сайта