Генетика
  Домой Медицинский фото атлас Психология отношений Медицинские видео ролики Медицинская библиотека Консультация врача  
Генетика:
Генетика
Аномалии хромосом
Биология клетки
Генетика врожденных пороков
Генетика рака - опухолей
Молекулярная генетика
Цитогенетика - исследование хромосом
Лечение наследственных болезней
Фармакогенетика
Рекомендуем:
Необходимое:
Книги по медицине
Видео по медицине
Фотографии по медицине
Консультации врачей
Форум
 

Молекулярный анализ мутаций у человека. Рекомендации

Что нужно сделать для идентификации мутации в гене у пациента с генетическим заболеванием, при котором известны или подозреваются дефекты в этом гене?

Рассмотрим пациента с бета-талассемией, аутосомно-рецессивным заболеванием, вызванным дефектом в гене бета-глобина. Первичный диагноз обычно устанавливают на основе только клинических и гематологических находок.

Тем не менее важно исследовать сам ген, во-первых, для подтверждения клинического диагноза, а во-вторых, для идентификации конкретной мутации, необходимой для диагностики носительства и возможной пренатальной диагностики в семье больного. Кроме того, идентификация мутации увеличивает понимание отношений между специфическими мутациями в гене и результирующими патофизиологическими изменениями.

Для исследования последовательности гена бета-глобина и его мРНК можно применить множество методов. Представлены ли у пациента обе копии гена, является ли их структура нормальной? Или же одна или даже обе копии гена отсутствуют, как это бывает в некоторых случаях талассемии?

анализ мутаций человека

Саузерн-блоттинг гена бета-глобина может ответить на вопрос, имеются ли в наборе оба гена бета-глобина и нормальны ли они по структуре в целом. Этим методом можно выявить большие молекулярные дефекты (делении, другие перестройки), не выявляющиеся при хромосомном анализе.

Саузерн-блоттинг, к сожалению, не может обнаружить наличие большинства однонуклеотидных мутаций или очень небольших делеций, затрагивающих только несколько пар оснований, если они не нарушают сайт опознавания эндонуклеаз.

Если присутствует видоизмененный, мутантный ген, транскрибируется ли он? Определить присутствие специфического транскрипта помогает Нозерн-блоттинг. Этот метод также позволяет обнаруживать крупные изменения в количестве мРНК и структуре специфического гена, но не обнаруживает незначительные изменения (например, мутацию, которая изменяет один кодон в экзоне).

Ответив на вопрос, есть ли большие изменения в гене или мРНК, можно переходить к анализу небольших отклонений в структуре гена и его экспрессии на более тонком уровне. При бета-талассемии, как и при многих других заболеваниях, известно множество мутаций, ответственных за развитие болезни.

Чтобы выяснить, какая из уже известных мутаций вызывает конкретный случай болезни, используют аллель-специфические олигонуклеотиды (АСО-зонды), способные обнаружить конкретную точечную (однонуклеотидную) мутацию. Если АСО-зонды не могут выявить известную мутацию, может понадобиться сравнение последовательности мутантного гена с нормальной последовательностью, применив ПЦР для получения большого числа копий участка гена для последующего секвенирования.

Таким образом, специфическая мутация, ответственная за генетическое нарушение у пациента, может быть идентифицирована и использована для разработки прямых скрининговых тестов для выявления ее в пораженной семье.

- Читать далее "Анализ последовательности ДНК. Особенности"


Оглавление темы "Молекулярная генетика":
  1. Ферменты рестрикции. Применение в молекулярной генетике
  2. Векторы, плазмиды в молекулярной генетике. Что такое вектор, плазмида?
  3. Библиотеки в молекулярной генетике. Что такое библиотека?
  4. Скрининг библиотек гибридизационными зондами в молекулярной генетике. Особенности
  5. Саузерн-блоттинг в молекулярной генетике. Особенности
  6. Аллель-специфичные олигонуклеотидные зонды в молекулярной генетике. Особенности
  7. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Особенности
  8. Молекулярный анализ мутаций у человека. Рекомендации
  9. Анализ последовательности ДНК. Особенности
  10. Методы анализа изображений флюоресцентно меченных нуклеотидов. Особенности
Загрузка...

   
MedUniver.com
ICQ:493-344-927
E-mail: reklama@meduniver.com
   

Пользователи интересуются:

Будем рады вашим вопросам и отзывам:

Полная версия сайта