Генетика
  Домой Медицинский фото атлас Психология отношений Медицинские видео ролики Медицинская библиотека Консультация врача  
Генетика:
Генетика
Аномалии хромосом
Биология клетки
Генетика врожденных пороков
Генетика рака - опухолей
Молекулярная генетика
Цитогенетика - исследование хромосом
Лечение наследственных болезней
Фармакогенетика
Рекомендуем:
Необходимое:
Книги по медицине
Видео по медицине
Фотографии по медицине
Консультации врачей
Форум
 

Векторы, плазмиды в молекулярной генетике. Что такое вектор, плазмида?

Вектор — молекула ДНК, способная к автономному копированию в клетке-хозяине, например бактериальной или дрожжевой клетке, из которой ее можно впоследствии выделить в чистой форме для анализа. Если с помощью ДНК-лигазы включить в вектор фрагмент ДНК человека, такую новую молекулу ДНК можно внести в бактериальную клетку для размножения включенного фрагмента вместе с молекулой вектора.

Репликация векторов может привести к появлению большого числа копий на одну клетку, а бактерии-хозяева могут расти в лаборатории бесконечно долго, производя значительные и легкодоступные количества включенной ДНК-последовательности. Объединение молекулы ДНК из различных источников, например фрагментов ДНК человека и вектора, называется технологией рекомбинантной ДНК. Обычно с этой целью используют множество векторов, каждый со своими преимуществами и ограничениями, но мы ограничим внимание наиболее часто используемым вектором — плазмидой.

Плазмиды

Плазмиды, используемые как векторы — кольцевые двойные молекулы ДНК, отделившиеся от бактериальной или дрожжевой хромосомы, способные к копированию независимо от собственных хромосом микроорганизма. Векторные плазмиды — производные от молекул естественного происхождения, сначала были обнаружены в бактериях.

векторы в молекулярной генетике

Поскольку они несли гены устойчивости к антибиотикам и могли легко переходить от одной бактерии к другой, плазмиды быстро распространяли устойчивость к антибиотику во всей микробной популяции.

Специально созданные для молекулярного клонирования плазмиды обычно невелики (несколько килобаз величиной) и содержат три обязательных компонента: оригинал для репликации (копирования в кишечной палочке или в дрожжах), один или более избирательных маркеров (например, ген, определяющий устойчивость к антибиотикам) и один или более сайтов рестрикции, которые могут быть использованы для удаления чужеродной ДНК.

Важные этапы, связанные с клонированием в плазмиде чужеродной ДНК с сайтом рестрикции EcoRI. Идентификация колоний, которые содержат искомую рекомбинантную плазмиду с последующим массовым ростом и выделением чистой плазмидной ДНК, позволяет накопить большие количества клонированной вставки. Некоторые плазмиды, оказавшиеся особенно полезными в ходе молекулярного клонирования, используются как ВАС (ВАС-векторы). ВАС-векторы — специально разработанные плазмиды, содержащие большие вставки ДНК, от 100 до 350 килобаз.

Разработка технологии ВАС потребовала многочисленных модификаций в генах плазмид и несущих бактерий, гарантирующих, что большие вставки чужеродной ДНК останутся стабильными и будут правильно копироваться в ходе деления бактерии-хозяина. Технология ВАС-векторов сыграла критически важную роль в проекте «Геном человека», позволив разделить весь геном человека на фрагменты, пригодные для анализа методом секвенирования.

- Читать далее "Библиотеки в молекулярной генетике. Что такое библиотека?"


Оглавление темы "Молекулярная генетика":
  1. Ферменты рестрикции. Применение в молекулярной генетике
  2. Векторы, плазмиды в молекулярной генетике. Что такое вектор, плазмида?
  3. Библиотеки в молекулярной генетике. Что такое библиотека?
  4. Скрининг библиотек гибридизационными зондами в молекулярной генетике. Особенности
  5. Саузерн-блоттинг в молекулярной генетике. Особенности
  6. Аллель-специфичные олигонуклеотидные зонды в молекулярной генетике. Особенности
  7. Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Особенности
  8. Молекулярный анализ мутаций у человека. Рекомендации
  9. Анализ последовательности ДНК. Особенности
  10. Методы анализа изображений флюоресцентно меченных нуклеотидов. Особенности
Загрузка...

   
MedUniver.com
ICQ:493-344-927
E-mail: reklama@meduniver.com
   

Пользователи интересуются:

Будем рады вашим вопросам и отзывам:

Полная версия сайта