Анализ частоты Y-хроматина крови и слюны. Подтверждение мужского пола по крови и слюне
При анализе частоты Y-хроматина в следах крови и слюны, а также в волосах получены аналогичные данные (Любинская С. И., Антонова С. Н., 1975,1976). Поэтому рекомендуются единые количественные критерии для диагностики половой принадлежности крови, слюны в следах и волос.
Они представлены в виде таблицы, в которой даны числовые соотношения клеток с Y-хроматином и без него. Применение критериев позволяет выносить объективное (в пределах заданной вероятности) решение о принадлежности крови мужчине или женщине по наименьшему в каждом конкретном случае числу исследуемых клеток. В расчетах использованы данные о частоте Y-хроматина, где минимальная частота Y-хроматинположительных ядер у мужчин составила 22%, а максимальная у женщин — 3%. Расчеты произведены с помощью метода математической статистики — последовательного анализа с 99% надежностью.
Мужской пол может быть установлен, если при исследовании не более 9 ядер обнаружено не менее 3 с Y-хроматином. Если три Y-хроматинположительные ядра будут найдены среди первых 3, 4, 5 и т. д. клеток, то мужской пол можно диагностировать раньше, чем будет исследовано 9 клеток; минимальное число, при котором диагностика возможна, — 3 клетки, если все они содержат Y-хроматин. Если из первых 9 исследованных клеток только 1 или 2 оказались Y-хроматинположительными, то исследование продолжают, пока не находят 4 клетки с Y-хроматином не более чем в 19 ядрах. Если 4 ядра с Y-хроматином обнаружены в меньшем числе клеток, то дальнейшее исследование можно прекратить, так как диагноз мужского пола установлен. В том случае, когда среди 22 исследованных клеток не было обнаружено ни одной с Y-хроматинположительным ядром, можно диагностировать женский пол (см. правую половину таблицы). Если встретилось хотя бы одно ядро, содержащее глыбку, похожую на Y-хроматин, то для того чтобы остановиться на диагнозе женского пола, необходимо продолжить анализ до 32 клеток, при двух ядрах — до 42 клеток и т. д.
Современные методики позволяют достоверно определять происхождение объектов как от женщины, так и от мужчины. Однако число клеток, необходимое для диагностики в каждом конкретном случае, может зависеть от применения той или иной методики. Например, для установления происхождения крови от мужчины по Х-хроматину требуется минимум 120 нейтрофилоцитов, в то время как при исследовании Y-хроматина возможно установить мужской пол минимум по 3 лимфоцитам, если все они имеют Y-хроматин. Приступая к исследованию, эксперт не знает, какое количество пригодных для анализа клеток он обнаружит в препарате. Поэтому в некоторых случаях заранее затруднительно определить оптимальную методику исследования, особенно если на экспертизу доставлен небольшой объект.
В таких случаях можно использовать комплексную методику исследования Х- и Y-хроматина в одном препарате. Методики установления половой принадлежности крови и слюны в следах, а также волос, основанные на выявлении Х- и Y-хроматнна, составляют единый метод, который может быть применен при исследовании одного препарата, приготовленного из единственного следа крови, слюны или одного волоса.
При использовании комплексной методики целесообразно вначале исследовать Y-хроматин, окрасив препарат флюорохромом. Если по тем или иным причинам он не выявлен, то препарат окрашивают азур-эозином для исследования Х-хроматина.
В связи с тем что установление половой принадлежности является фрагментом судебно-биологической экспертизы следов крови, слюны и волос, необходимо до цитологического исследования располагать данными о природе объекта (кровь, слюна, волос), видовой, а при необходимости и групповой его принадлежности.
В заключение считаем необходимым отметить также, что приведенные методики предназначены для установления половой принадлежности объектов, произошедших от людей, хромосомный пол которых совпадает с паспортным. Источником ошибок могут быть редкие случаи аномалий полового развития или аберраций Y-хромосомы, такие, как набор половых хромосом XY у женщины, резко уменьшенное тельце Y-хроматина или его отсутствие у мужчины.
