• Вместо обычного хроматина с последовательностью CDE-II связан специальный белковый комплекс
• Для функционирования центромеры необходим комплекс белков под названием CBF3, который связывается с CDE-III
• Белки, связывающие два этих комплекса, могут обеспечивать присоединение центромеры к микротрубочкам
Возможно ли идентифицировать белки, необходимые для функционирования CEN-последовательностей? Известны несколько генов, мутации в которых влияют на сегрегацию хромосом и продукты которых локализуются на центромерах. На рисунке ниже схематически представлено участие этих белков в формировании структуры центромер.
При связывании последовательности CDE-II с белком, который называется Cse4p, образуется специальная структура хроматина, которая напоминает один из гистонов, являющийся его основной структурной единицей. В этот комплекс также может входить или присоединяться к нему белок Mif2p. В хромосомах клеток высших эукариот белкам Cse4p и Mif2p соответствуют аналоги, CENP-A и CENP-C.
Это позволяет предполагать, что взаимодействие последовательности с белками может представлять собой общий принцип организации конструкции центромеры. При таком взаимодействии ДНК, локализованная в области CDE-II, закручивается вокруг белкового агрегата; по-видимому, этому способствует существование изгиба последовательности CDE-II.
Последовательность CDE-I связана с гомодимером CBF-1: вероятно, это взаимодействие не влияет на функции центромеры, но в его отсутствие точность сегрегации хромосом снижается примерно в 10 раз. Комплекс CBF3, состоящий из четырех белков и имеющий массу 240 кДа, связывается с последовательностью CDE-III. Это взаимодействие необходимо для функционирования центромеры.
Белки, связанные с CDEI и CDE III, также связываются между собой и с белками, присоединенными к последовательности CDE II еще одной группой белков (Ctf19, Mcm21, Okp1). Возможно, связывание с микротрубочками происходит с участием этого комплекса.
Согласно универсальной модели, комплекс локализован на центромере с помощью белковой структуры, которая напоминает структурную единицу хроматина (нуклеосому). Из-за изгиба ДНК, входящей в эту структуру, белки, связанные с фланкирующими элементами, представляют собой часть единого комплекса. Некоторые компоненты комплекса (по-видимому, непосредственно не связанные с ДНК), участвуют в связывании центромеры с микротрубочками. Вероятно, у большинства организмов строение кинетохора одинаково, и он состоит из близких по составу компонентов.
ДНК, включающая последовательность CDE-II, обернута вокруг белкового комплекса,
состоящего из Cse4p, CDE-III связан с CBF3, и CDE-I с CBF1.
Эти белки соединены посредством группы, состоящей из Ctf 19, Mcm21, и Okp1.
