Хромосомные аномалии при лимфогранулематозе - прогноз
Лимфогранулематоз (Hodgkin's lymphoma) представляет собою клональное новообразование из малигнизированных В-клеток терминального центра лимфатических узлов с перестроенным (реаранжированным) генами Н-цепей иммуноглобулинов (IgH) и приобретших соматические мутации («мутированный» VH-статус).
В большинстве случаев опухолевые клетки составляют лишь небольшую фракцию в каждом образце из пораженной ткани, поступающем для морфологического и/или цитогенетического анализа. Это многоядерные клетки Березовского—Штернберга или одноядерные клетки Ходжкина (в англоязычной литературе соответственно Reed-Sternberg cells и Hodgkin's cells).
При цитогенетическом анализе в пораженных лимфатических узлах выявляются клоны полиплоидных клеток с множественными числовыми изменениями кариотипа и очень сложными структурными перестройками хромосом. Происхождение возникающих хромосомных маркеров трудно установить без дополнительных молекулярно-генетических методик. Доля клеток с хромосомными нарушениями обычно менее 50 %, большинство метафазных пластинок нормальные.
Показано, что клоны цитогенетически измененных клеток — это клоны CD30-позитивных элементов. Как правило, это клетки Ходжкина и Березовского — Штернберга.
Лимфогранулематоз сравнительно мало исследовали с помощью стандартного цитогенетического метода, поскольку, во-первых, опухолевых клеток значительно меньше, чем нормальных, а во-вторых, из этой опухоли трудно получить пригодные для анализа хромосомные препараты. Имеется несколько оригинальных публикаций и обзоров.
Характерные (повторяющиеся) аномалии кариотипа выявлены главным образом с помощью таких молекулярно-генетических подходов, как FISH, FICTION и сравнительная геномная гибридизация (CGH).
Некоторые исследователи отмечают своеобразие нарушений кариотипа при лимфогранулематозе: характерны моносомии и делеции хромосомы 13, а также перестройки, затрагивающие районы 2р25, 12р11-13, 13р11-13, 14р11, 15pll-13, 20q12—13. В других работах, выполненных теми же методами, установлен несколько отличающийся спектр нарушений кариотипа,
Так, по данным S. Joos и соавт., наиболее часто наблюдается избыток хромосомного материала районов 2р, 9р и 12q, причем амплифицированы участки 4p16, 4q23-24, а также 9р23-24.
Лимфогранулематоз. Частота появления дополнительного материала и утрат различных участков генома по данным метода сравнительной геномной гибридизации. Результаты обследования 41 пациента нанесены на схему нормального кариотипа — идеограмму. Каждому случаю соответствует вертикальная линия. Справа — приобретения, слева — утраты. Сравнительно часто наблюдается дополнительный материал в области короткого плеча хромосом 2, 9, 17, X и длинного плеча хромосом 9, 12, 17, X, реже — утраты в области короткого плеча хромосом 17 и X, а также длинного плеча хромосом 4, 13 и X.
Приведем частоты различных нарушений (утрат и избытка хромосом) из работы S. Joos и соавт., в которой также использовалась CGH. Повторяющиеся утраты генетического материала обнаружены авторами только в длинном плече хромосомы 13 (22 % случаев). Напомним, что эти нарушения характерны также для таких разных опухолей из зрелых В-клеток, как множественная миелома и ХЛЛ; в первом случае они имеют отрицательное прогностическое значение, а во втором ассоциированы с хорошим прогнозом.
Причина таких различий остается невыясненной. Мы не нашли в литературе данных о прогностическом значении делеций 13q при лимфогранулематозе. Кроме делеций 13q, по данным Joos и соавт., для лимфогранулематоза характерны перестройки, приводящие к избытку хромосомного материала. Так, в хромосомном районе 2р частота нарушений составляет 64%, 12q — 37%, 17р — 27 %, 9р-24%, 16р — 24 %, 17q — 20 %, 20q-20%.
Большинство исследователей считают, что для лимфогранулематоза характерны перестройки короткого плеча хромосомы 2 (2р). Так, в одной из недавних работ приводятся результаты исследования лимфатических узлов 44 больных, причем изучались два гена, расположенные в области 2р: BCL1A и REL. Оба гена являются транскрипционными факторами и оба уже были «замечены как соучастники» в генезе лимфом.
Авторам работы удалось обнаружить амплификацию хромосомного района 2р13 у 55 % больных лимфогранулематозом, причем были выявлены частые изменения именно гена REL: в одних случаях это была амплификация, в других — участие в транслокациях с различными хромосомами.
Специфические изменения кариотипа, характерные только для лимфогранулематоза, отличающие его от других опухолей, не выявлены.
Применение молекулярно-генетических методик позволило обнаружить изменения генов ТР53, IкВа и CD95. Частота случаев с этими мутациями варьирует. В клетках Березовского—Штернберга и Ходжкина нередко наблюдаются мутации генов JAK2, с-REL, MDM2, которые считают вовлеченными в процесс малигнизации.
Фактические данные однозначно свидельствуют в пользу практической значимости хромосомного анализа при гемобластозах. Показано, что у хромосомного анализа, как и у любого лабораторного метода, есть ограничения: прежде всего не очень высокая чувствительность и разрешающая способность по сравнению с молекулярно-генетическими методиками. Наибольшая точность диагностики достигается при рациональном сочетании классического хромосомного анализа с различными молекулярно-генетическими, цитохимическими и иммунофенотипическими исследованиями.
Онкологическая цитогенетика — уже зрелая, но постоянно развивающаяся область науки, в которой обязательно будут получены новые знания:
1) будут определены новые неслучайные изменения кариотипа; важные для диагностики;
2) будут выявлены новые хромосомные участки, в которых локализованы еще неизвестные гены, вовлеченные в онкогенез;
3) будут выявлены новые прогностические маркеры.
Остается еще ряд нерешенных вопросов, в частности:
1) неясно практическое значение многих редких цитогенетических и молекулярно-генетических аномалий, повторяющихся при разных вариантах лейкозов и лимфом;
2) неясна роль вторичных (дополнительных) изменений кариотипа в прогрессии заболевания и значение этих изменений в прогнозировании ответа на лечение;
3) нет пока рациональных протоколов молекулярного мониторинга МРБ, адаптированных к отдельным группам гемобластозов и программам их лечения.
Эти и другие неясные вопросы онкологической цитогенетики могут быть решены только большими многоцентровыми исследованиями.
