МедУнивер - MedUniver.com Все разделы сайта Видео по медицине Книги по медицине Форум консультаций врачей  
Рекомендуем:
Гематология:
Гематология
Физиология крови
Методы исследования
Анемии
Полицитемии
Острые лейкозы
Миелодиспластические синдромы (МДС)
Хронические лейкозы
Лимфомы
Гистиоцитозы - гистиоцитоз Х
Макроглобулинемии
Коагулопатия
Патология тромбоцитов
Переливание крови
Трансплантация стволовых клеток (костного мозга)
Кожа при болезнях крови
Книги по гематологии
Иностранные книги по гематологии
Форум
 

Тест аутогемолиза эритроцитов - методика, показатели нормы

Принцип теста аутогемолиза эритроцитов. Хранение эритроцитов в аутологической сыворотке, в течение нескольких дней обусловливает развитие постепенного гемолиза, который обретает более резкий характер при наследственном сфероцитозе.

Материалы и реагенты теста аутогемолиза эритроцитов: стерильные флаконы Эрленмайера с 10— 20 стеклянными шариками 2—4 мм; чаши для центрифуги вместимостью 10 мл, стерильные и закупоривающиеся пробкой; стерильные пипетки на 0,1 и 1 мл; пробирки на 10/100 мм; штативы; фотоколориметр; стерильную глюкозу в виде 10% раствора в 8,5% растворе NaCl; 8.5‰; стерильный раствор NaCl; раствор 0,01М NH4OH.

Техника теста аутогемолиза эритроцитов. В 4 стерильные чаши для центрифуги, закрытые резиновыми пробками, из которых в двух находится по 0,1 мл 8,5‰ раствора NaCl, а в других двух по 0,1 мл стерильного 10% раствора глюкозы влить по 2 мл крови, стерильно отобранной в флакон Эрленмайера и предварительно дефибринированной путем встряхивания в посуде со стеклянными шариками.

Далее все четыре чаши подвергаются инкубации в течение 24 и 48 часов, при температуре 37°С, при этом после каждого интервала содержимое гомогенизируется путем легкого вращения. Затем из одной чаши, содержащей глюкозу и из другой, не содержащей глюкозу, отобрать по 0,2 мл крови и влить в 10 мл раствора NH4OH, в виду определения концентрации гемоглобина.

гемолиз эритроцитов

Для каждой из проб определить гематокрит. Остаток каждой пробы процентрифугировать; из надосадочной массы (сыворотки) отобрать по 0,2 мл и влить в 10 мл раствора NH4OH. Определить оптическую плотность при 540 нм или с помощью зеленого фильтра.

Прочет результата на гемолизате цельной крови провести по сравнению с раствором NH4OH, в то время как на сывороточной пробе — по сравнению со смесью 0,2 мл предварительно поддвергнутой инкубации сыворотки и 10 мл раствора NH4OH.

Расчет, толкование результатов теста аутогемолиза эритроцитов. В процентном выражении гемолиз расчитывается по формуле: % гемолиза = ОПСт (100 — Гктт) / (ОПБт х 10), где: ОПСт = оптическая плотность, получаемая от сыворотки во время Т (24 и 48 ч.); Гктт = гематокрит во время Т; ОПБт == оптическая плотность, получаемая от пробы крови во время Т.

В нормальной пробе, лишенной глюкозы, аутогемолиз спустя 48 часов составляет 3,5%, а в присутствии глюкозы — менее 0,6%. Аутогемолиз завышен при наследственном сфероцитозе, однако недостаток исправим почти полностью добавлением глюкозы.

Умеренный (3—6%) и исправимый, с помощью глюкозы, аутогемолиз встречается при несфероцитной врожденной гемолитической анемии, отнесенной к типу I, в то время как выраженный аутогемолиз (7— 15%), не сокращающийся в присутствии глюкозы, характеризует несфероцитную врожденную гемолитическую анемию типа 2.

Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021

- Вернуться в раздел "гематология"

Оглавление темы "Лабораторная диагностика в гематологии":
  1. Тест сиклизации гематий при гемоглобине S - методика проведения
  2. Тест тепловой неустойчивости гемоглобина - методика, показатели нормы
  3. Методика выявления телец Гейнца
  4. Тест на выявление телец включения гемоглобина Н
  5. Спектральное исследование крови для диагностики врожденной метгемоглобинемии - гемоглобина М
  6. Количественное определение ферментов в эритроцитах - методика, показатели нормы
  7. Тест восстановления метгемоглобина (метод Brewer) при недостатке ферментов в эритроцитах
  8. Тест флюоресцентного пятна (Beutler) при недостатке ферментов в эритроцитах
  9. Тест на осмотическую резистентность эритроцитов - методика, показатели нормы
  10. Тест аутогемолиза эритроцитов - методика, показатели нормы
Медунивер Мы в Telegram Мы в YouTube Мы в VK Форум консультаций врачей Контакты, реклама
Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.