Методика реакции на костномозговой гемосидерин - оценка результатов
Принцип реакции на костномозговой гемосидерин - метод Пирлса. Оценка запаса негеминного железа осуществляется путем полуколичественного определения костномозгового гемосидерина, который, при вступлении в контакт с железистосинеродистым калием в кислой среде окрашивается в синий цвет.
Реагенты для реакции на костномозговой гемосидерин:
1. 40% формалин.
2. Раствор кислого железистооинеродистого калия, из расчета 0,8 г железистосинеродистого калия на 80 мл двудистилированной воды. После растворения фильтрируется, затем добавляется 0,8 мл концентрированной соляной кислоты.
3. Отфильтрованный 0,1% раствор сафранина в дистилированной воде.
4. Дистилированная вода.
Техника реакции на костномозговой гемосидерин
1) закрепление на парах формалина, 30 мин.;
2) промывание двухдистилированной водой;
3) окраска кислым железосинеродистым раствором (свеже приготовленным), в течение 60 мин.,
Рекомендуется при реакции на костномозговой гемосидерин
а) правильный отбор мазков, которые доляшы содержать размозженные комочки;
б) на стекле не делать пометок графитовым карандашом;
в) стеклянная посуда — безукоризненно чистая;
г) двухдистилированную воду получать из стеклянного (не металлического) дистиллятора и хранилища, для предупреждения каких-либо следов железа;
д) потреблять железистосинеродистый калий в виде желтых кристаллов;
е) для сопоставления результатов реакции применять положительный и отрицательный контрольный материал;
ж) в ближайшем прошлом больному не назначали переливание или железотерапию.
Критерии дифференциации отдельных видов гипохромной анемии по костному мозгу
Вид анемии
Степень гипохромии
Сидеремия
Сидеробласты
Гемосидерин в макрофагах
Железодефицитная акемия
выраженная
заниженная
отсутствуют - < 10 %
отсутствует
Анемия, вызванная инфекцией, новообразованием
умеренная
заниженная
заниженные отсутствуют
завышенный
Талассемия
выраженная
завышенная
завышенные
завышенный
Анемия при сатурнизме
умеренная
завышенная
завышенные
завышенный
Анемия, реагирующая на пиродиксин
умеренная
завышенная
завышенные
завышенный
Сидеробластическая анемия
выраженная
завышенная
кольчатые, завышенные
весьма завышенный
Результаты реакции на костномозговой гемосидерин
Костномозговой гемосидерин окрашен в синий цвет, представляется в виде мелких зерен в эритробластах (сидеробластах) и эритроцитах (сидероцитах), и в виде крупных зерен или рассеянно — в макрофагах. В нормальных обстоятельствах сидероциты находятся в малом количестве (1—5%0) и не представляют практического значения, в то время как сидеробласты колеблятся от 10 до 60%.
Гемосидерин макрофагов отражается полуколичественно по сравнению с нормой: наличный (в норме или завышенный) или отсутствует.
Практическое значение реакции на костномозговой гемосидерин. Рассматривается как наиболее простой и чувствительный способ отождествления запасов костномозгового железа. Способствует дифференциации железодефицитной и прочих видов гипохромной анемии, вызываемых блокажем синтеза гема и количественным ростом негеминного железа.