Методика определения группы крови по Beth-Vincent и Simonin
В гематологической клинике решающую роль выполняют две группы методов:
а) определяющих группы крови и трансфузионную совместимость;
б) выявляющих ауто- и изоантитела эритроцитов, с помощью которых устанавливается наличие ауто- и изоиммунной гемолитической анемии.
В нижеследующем дается краткое описание этих обиходных методов, без которых не может обойтись ни одна больничная клиническая лаборатория.
Метод Beth-Vincent для определения антигенов 0АВ эритроцитов (на предметном стекле)
Используется свежеотобранная кровь, без противосвертывающего вещества, из которой приготовляется 50% взвесь в собственной сыворотке.
На предметное стекло нанести, слева на право, три капли сыво-ротки-тест, из них первая капля принадлежит сыворотке анти А+анти В (от донора группы 0), вторая капля — сыворотке анти-В (от донора труппы А) и третья — сыворотке анти-А (от донора группы Б). С помощью пастеровской пипетки добавить капельку взвеси, подлежащих исследованию эритроцитов. Пропорция между каплей-тест и каплей исследуемых эритроцитов равняется 10/1. Тремя различными углами пластинки микроскопа прогомогенизировать каждую каплю.
Спустя 3 мин., в течение которых препарат находился в комнатной температуре, сделать макроскопическое исследование по таблице.
Определение группы крови 0АВ методами Beth-Vincent и Simonin, в зависимости от наличия или отсутствия агглютинации с помощью сыворотки и эритроцитов-тест
Метод Simonin для определения группы крови 0АВ путем отождествления агглютининов в исследуемой сыворотке
В качестве реагента используются эритроциты-тест группы 0, А, В, в виде 50% взвеси в физиологическом растворе.
На предметное стекло нанести 3 капли исследуемой сыворотки, добавить — с помощью трех разных пастеровских пипеток — по одной капле из имеющихся трех взвесей эритроцитов-тест, в следующем порядке, слева направо: в первую очередь эритроциты 0, затем А, и в конце В.
Пропорцию 10/1 соблюдать и в данном случае в отношении капли исследуемой сыворотки и капли эритроцитов-тест, причем последняя: должна быть небольшой. После гомогенизации всех трех капель — подобно методу Beth-Vincent — прочитать агглютинацию спустя 3 мин. хранения в комнатной температуре, затем определить группу крови по таблице.
Причины погрешностей при определении группы крови ОАВ. Техника определения группы крови ОАВ предполагает следующие две категории погрешностей: ложноположительная реакция агглютинации и ложноотрицательная реакция. Допускаемую погрешность можно отнести за счет: а) исследуемых эритроцитов или эритроцитов-тест, б) исследуемой сыворотки или сыворотки-тест, в) применяемой техники.
Ложноположительная реакция может возникнуть по причине заражения используемых в реакции сыворотки или эритроцитов, наличия нерегулярных антител, химического заражения, образования эритроцитных валиков. Когда прочет результата агглютинации делается с опозданием, развивается явление псевдоагглютинации (что можно устранить добавлением капли физиологического раствора с последующей гомогенизацией).
Ложноотрицательная реакция развивается, когда срок пользования сыворотки-тест истек, больной группы А или В получил большое количество крови группы 0, антигены эритроцитов слабые или подлежащие испытанию сыворотки малого титра анти-А или анти-Б агглютининов.
В отдельных случаях недобавление сыворотки-тест, небрежное выявление тонких комков агглютинации, быстрый преждевременный, на 1—2 мин. раньше срока, прочет приводит к ложноотрицательному результату.
В связи с большими возможностями допущения погрешности следует заключить о необходимости определения групп крови ОАВ е любом случае обоими методами (Beth-Vincent и Simonin) лишь специально обученным в уездном центре по отбору и хрнанению крови, персоналом, одаренным особыми качествами (сосредоточенность внимания, терпение, чувство высокой профессиональной ответственности).
