Морфология и цитохимия острых лейкозов - цитохимические реакции
Бласты при остром миелобластном лейкозе обычно крупные клетки с округлым или неправильной формы ядром. Патогномоничным морфологическим маркером острого миелобластного лейкоза является обнаружение в цитоплазме бластных клеток гранул или линейной азурофильной зернистости (палочек Ауэра).
Большинство форм острого миелобластного лейкоза, в отличие от острого лимфобластного лейкоза, может быть идентифицировано морфологически. Миелобласты делятся на типы в зависимости от числа и качества гранул (в бластах I типа нет гранул; бласты II типа содержат до 15 нежных гранул; в бластах III типа — множество азурофильных гранул).
Лимфобласты обычно мелкие, ядро более правильной формы, цитоплазма скудная и агранулярная.
Сущность цитохимических исследований заключается в выявлении в клетке ферментов и цитоплазматических включений, характерных для того или иного типа клетки. В процессе цитохимической реакции происходит взаимодействие находящегося в клетке фермента или иного вещества с реагентами рабочего раствора.
Основные цитохимические реакции, использующиеся для диагностики и дифференциальной диагностики острого лейкоза:
1) наиболее важно выявление миелопероксидазы (фермента азурофильных гранул клеток гранулоцитарного и моноцитарного рядов); эта реакция может быть положительной при отсутствии видимых гранул;
2) вторым по значимости является судан черный В; если одна из двух реакций положительна более чем в 3% бластов, это свидетельствует об их принадлежности к миелоидной линии;
3) неспецифическая эстераза типична для моноцитов и монобластов, но может выявляться при остром лимфобластном лейкозе и МЗ; эти реакции чувствительны к ингибированию фторидом натрия, что используется для дифференциальной диагностики;
4) положительная PAS-реакция свидетельствует о наличии в клетках гликогена и наиболее типична для острого эритромиелоза; гликоген выявляется также при остром лимфобластном лейкозе и других типах острого миелобластного лейкоза
5) нафтол AS-D хлорацетатэстераза обнаруживается в созревающих миелоидных клетках;
6) кислая фосфатаза выявляется при Т-ОЛЛ;
7) а-нафтолбутиратэстераза свидетельствует о моноцитарной дифференцировке клеток.
Для верификации варианта острого лейкоза используются и другие методы. Так, для диагностики М4 и М5 вариантов острого миелобластного лейкоза используется цитобактериальный тест на лизоцим.