В ряде случаев, когда при исследовании отсутствуют статистически значимые изменения по сравнению с параллельным контролем, возможны скрытые нарушения равновесия с внешней средой (сужение адаптационных возможностей), выявляемые с помощью функциональных нагрузок, адекватных по силе и направленности действия. Наиболее рационально для этой цели использовать пороговые нагрузки, позволяющие выявлять влияние вещества на быстро реагирующие системы (центральная и вегетативная нервная, сердечно-сосудистая, гипофиз-адреналовая и др.).
Возможно также применение экстремальных нагрузок: плавание, бег на третбане, голод, кровопускание, облучение, гипер- и гипотерапия, гипоксия, введение тифо-паратифозной вакцины, алкоголя и т.д. Рекомендовано также введение сублетальных доз исследуемого вещества либо применение токсических нагрузок на системы, в отношении которых исследуемое соединение проявляет специфическую активность.
Большое значение для экспериментального установления порогов действия имеет выбор функции (органа, системы) исследуемого показателя, адекватного характеру действия вещества. Наибольшее распространение в профилактической токсикологии получили так называемые неспецифические (интегральные) показатели, характеризующие системное организменное реагирование на действие вещества. Это относится прежде всего к состоянию центральной и вегетативной нервных систем, эндокринной системы, системы крови, интенсивности обменных процессов, поведенческих реакций. Интегральные показатели обязательно изучаются и при действии веществ, обладающих специфической активностью, так как сопоставление специфических и неспецифических сдвигов позволяет оценивать степень специфических изменений с точки зрения критерия вредности.
Специфические показатели характеризуют действие химических веществ, обладающих тропизмом в отношении отдельных органов и систем, связанным с механизмом биологического действия вещества. Примером ядов, оказывающих специфическое действие, могут служить тяжелые металлы — блокаторы сульфгидрильных групп, фосфорорганические соединения — блокаторы холинэстеразы, нитро- и аминосоединения — метгемоглобиноб-разователи, а также ряд других веществ, в том числе и обладающих способностью специфически влиять на генетический аппарат, вызывая отдаленные последствия интоксикации (канцерогенные, мутагенные, тератогенные и т.д.).
Установление порогов действия ядов в профилактической токсикологии производится в отношении количеств вещества, действующих в течение заданных параметров времени. Наиболее информативными величинами являются порог однократного (острого) действия Limac и порог хронического действия Lirrich. Время экспозиции при установлении порогового показателя определяется задачей эксперимента и его декретированной длительностью. Устанавливаются также пороги действия по ряду специфических показателей (Lirtisp), к каковым относятся пороги раздражающего, аллергенного, гонадотропного, обонятельного действий и др.
Изложенное выше свидетельствует о том, что практически во всех случаях речь идет об установлении "практического порога действия", являющегося договорной величиной, основанной на целом ряде допущений, но вместе с тем достаточной для обоснования гигиенического норматива. Степень точности установленной пороговой величины обусловлена многими факторами, в том числе точностью методов индикации, числом подопытных животных, числом испытуемых доз (концентраций), диапазоном исследуемых величин, возможностью поддержания стабильных уровней доз, выбранным математическим методом и т.д. Технически наиболее сложно установление пороговых величин веществ, обладающих высокой токсичностью и узкой зоной токсического действия.
