Субконъюнктивальное профилактическое введение антибиотика после травмы глаза
При использовании медикаментов в пролонгирующих лекарственных формах, в частности в форме ГЛП, установлено значительное удлинение действия лекарственного вещества, входящего в состав ГЛП, благодаря ее лекарственной основе (акриламид и его сополимеры). Поэтому можно предположить возможность создания терапевтической и длительно сохраняющейся концентрации антибиотика в полости глаза при введении ГЛП непосредственно под слизистую оболочку глазного яблока.
С целью подтверждения или опровержения данного предположения нами было проведено экспериментальное исследование по изучению фармакокинетики антибиотика во внутриглазных жидкостях в случае введения ГЛП, содержащей гентамицин, под конъюнктиву.
Глазные лекарственные пленки, содержащие 1,5 мг гентамицина сульфата, вводились кроликам иод конъюнктиву глазного яблока через се разрез длиной 2-3 мм после предварительной местной анестезии 1% раствором дикаина. Разрез слизистой оболочки закрывался t-2 шелковыми швами. Исследование было проведено на 72 кроликах (144 глаза). Содержание гентамицина во влаге передней камеры и в стекловидном теле определяли в сроки от 1 ч до 8 сут с момента введения ГЛП.
Для получения достоверных результатов брали по 6 проб исследуемого материала (то есть из 6 глаз) через каждый интервал времени. В контрольной группе (16 глаз, 8 кроликов) под конъюнктиву вводили ГЛП, не содержащие антибиотик. Забор материала производили через 1, 3, 6 и 9 ч. Шприцы и иглы, с помощью которых осуществлялся забор материала, перед каждым забором тщательно промывали дистиллированной водой и подвергали стерилизации. Как показали исследования, в контрольной группе животных зон задержки роста тест-культуры не наблюдалось.
После однократного введения ГЛП-гентамицина сульфата под конъюнктиву глазного яблока наиболее высокие и длительно сохранявшиеся концентрации антибиотика наблюдаются во влаге передней камеры. Накопление гентамицина происходит постепенно, достигая своего максимального уровня спустя 6 и 9 ч (3,92 и 4,23 мкг/мл). В дальнейшем содержание антибиотика во влаге передней камеры уменьшается, но даже спустя 2 сут после введения ГЛП под конъюнктиву препарата определялся в еще достаточно высокой концентрации (3,72 мкг/мл).
Концентрация антибиотика в стекловидном теле при данном способе применения гентамицина ниже, чем в камерной влаге. Спустя 6 и 9 ч после введения ГЛП под конъюнктиву содержание препарата в стекловидном теле составляет 1,8 и 1,95 мкг/мл соответственно. В дальнейшем концентрация гентамицина уменьшается, составляя через 2 сут 1,45 мкг/мл. В более поздние сроки концентрация гентамицина в стекловидном теле уменьшается более быстрым темпом и спустя 5 сут после введения ГЛП под конъюнктиву антибиотик в стекловидном теле практически не определяется.
Таким образом, после однократного введения ГЛП-гентамицина сульфата под конъюнктиву глазного яблока во внутриглазных жидкостях создается длительно сохраняющаяся концентрация антибиотика. Во влаге передней камеры гентамицин при данном способе местного применения обнаруживается в течение 7, а в стекловидном теле — в течение 4 сут после введения ГЛП под конъюнктиву. При этом в течение 2 сут сохраняется содержание препарата в камерной жидкости на уровне, соответствующем подавляющей концентрации гентамицина в отношении большинства штаммов Staphylococcus aureas, Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.
В последующие 5 сут сохраняющаяся во влаге передней камеры концентрация препарата также активна, но только в отношении наиболее чувствительных штаммов микроорганизмов. Содержание антибиотика в стекловидном теле после однократного введения ГЛП-гентамитцина под конъюнктиву недостигает уровня, соответствующего подавляющей концентрации препарата одновременно в отношении большинства штаммов указанных бактерий.
С целью изучения эффективности подконъюнктивального введения антибиотикосодержащих ГЛП, как способа профилактики внутриглазной бактериальной инфекции, нами были проведены 2 серии исследований. В первой серии опытов, проведенных на 15 кроликах, в переднюю камеру глазного яблока проколом в области лимба после предварительной местной анестезии 1% раствором дикаина вводили суточную культуру Staphylococcus aureas (5000 микробных тел в 0,1 мл 0,9% раствора хлорида натрия).
Во второй серии опытов, проведенных также на 15 кроликах, после предварительной местной анестезии 1% раствором дикаина взвесь Staphylococcus aureas в той же микробной дозе вводили интравитреально через прокол в области экватора глазного яблока. В обеих сериях опытов одновременно заражали оба глаза. В дальнейшем левый глаз оставляли без лечения, что служило контролем. Под конъюнктиву правого глазного яблока однократно вводили ГЛП-гентамицина сульфата (1,5 мг/пл) с профилактической целью через 3, 6 и 9 ч после заражения. Соответственно каждому интервалу времени исследовано по 5 глаз.
Спустя сутки после заражения в левом (контрольном) глазу кроликов появлялись признаки прогрессировавшего внутриглазного инфекционного процесса. В зависимости от способа заражения инфекция протекала в виде гнойного иридоциклита или эндофтальмита.
Введение ГЛП-гентамицина сульфата под конъюнктиву спустя 3, 6 и 9 ч с момента внутрикамерного заражения правого глаза кроликов во всех случаях предупреждало развитие внутриглазной инфекции. При этом необходимо отметить, что у 2 из 5 кроликов, которым ГЛП были введены под конъюнктиву через 9 ч после заражения, на момент введения пленок наблюдались признаки начинающегося иридоциклита в виде наличия преципитатов на задней поверхности роговицы и гиперемии радужной оболочки.
Однако на вторые сутки после введения ГЛП-гентамицина сульфата под слизистую оболочку глаза признаки иридоциклита практически полностью исчезли без назначения какого-либо дополнительного лечения. Следовательно, в данных случаях разработанный способ проявил лечебный эффект.
Введение ГЛП-гентамицина сульфата под слизистую оболочку глазного яблока предупредило развитие внутриглазной инфекции также в некоторых случаях интравитреального заражения глаза кроликов. Профилактический эффект был отмечен в 3 из 15 случаев интравитреального заражения и, главным образом, при введении ГЛП через 3 ч после инъекции микробной взвеси в стекловидное тело.
Таким образом, проведенное нами экспериментальное изучение разработанного способа терапевтического воздействия на внутриглазную бактериальную инфекцию переднего отдела глаза показало его высокую эффективность. Разработанный способ в настоящее время широко используется в Московском научно-исследовательском институте глазных болезней им. Гельмгольца с целью профилактики и лечения гнойного иридоциклита после прободной травмы и хирургического вмешательства со вскрытием полости глазного яблока.
В последние годы техника введения ГЛП под конъюнктиву была несколько изменена. Нами предложено использовать для этой цели ГЛП в виде остроконечного клипа. ГЛП берут пинцетом за широкую часть и острым концом, учитывая высокую жесткость ГЛП до момента контакта с жидкостями, быстро прокалывают конъюнктиву нижнего свода и проталкивают в образовавшийся дефект конъюнктивы ГЛП. Под конъюнктивой ГЛП в течение нескольких минут набухает и блокирует входное отверстие в конъюнктиве. Дополнительное наложение швов при таком методе введения не требуется. Широкое внедрение разработанной методики, к сожалению, в настоящее время ограничено из-за отсутствия серийного производства разработанной нами ГЛП.