Крупноклеточные лимфомы могут быть похожи на другие анапластические опухоли. Общий лейкоцитарный антиген (LCA, CD45) проявляет мембранную экспрессию почти во всех лимфоидных клетках и, как уже сообщалось, лишь изредка в негематопоэтических клетках. LCA может отсутствовать в лимфомах из предшественников В- или Т-клеток (лимфобластных). Анапластические крупноклеточные лимфомы, как и классические клетки Ходжкина/ Рид-Штернберга, также часто являются LCA-негативными.
Анапластические крупноклеточные лимфомы часто экспрессируют эпителиальный мембранный антиген (ЕМА), что наряду с LCA-негативностью может говорить об эпителиальной опухоли. Однако ЕМА экспрессируется на плаз-моцитах и клетках ряда лимфом. Многие эпителиальные опухоли (карциномы) экспрессируют низкомолскулярные цитокератины. В редких случаях, когда низкомолекулярные цитокератины были описаны в клетках лимфом, это обычно имело форму парануклеарного пятна. Большинство злокачественных меланом можно идентифицировать при использовании антител к белку S100 и НМВ45.
Особенностью В-лимфоцитов является способность синтезировать иммуноглобулины (Ig), что должно способствовать наиболее надежной идентификации этих клеток. На практике же в большинстве лабораторий с этой целью иммуноглобулины не используются. Главная причина этого состоит в том, что иммуноглобулины плазмы вызывают диффузионные артефакты (особенно в плохо фиксированных тканях), зачастую приводящие в замешательство и затрудняющие понимание специфического окрашивания.
Клетки, которые оказываются позитивными на иммуноглобулины вследствие пассивного поглощения, обычно проявляют равномерное окрашивание цитоплазмы, наиболее интенсивное около клеточной мембраны. Внутри узла эти клетки часто встречаются в широких тяжах, соответствующих области проникновения фиксатора в ткань. В синтезирующих иммуноглобулин клетках он имеет вид либо зерен вследствие накопления внутри эндоплазматического ретикулума, либо больших включений. Синтезируемый иммуноглобулин часто проявляется в виде как парануклеарного (область аппарата Гольджи) окрашивания, так и сильного окрашивания вокруг ядра, соответствующего иммуноглобулину перинуклеарного пространства. IgM синтезируется значительной частью диффузных крупноклеточных В-лимфом и из-за большого молекулярного размера и относительно низкой концентрации в плазме проявляет по сравнению с другими иммуноглобулинами меньше диффузионных артефактов.
Помимо использования иммуноглобулинов в качестве маркеров В-клеток, они могут применяться и как маркеры клонирования. Клональные (опухолевые) популяции являются монотипными (т. е. экс-прессируют только одну легкую цепь). Монотипия может быть затруднена для понимания из-за фоновой популяции реактивных клеток, которые обычно экспрессируют каппа- и лямбда- легкие цепи в соотношении 2 : 1. В целом, реактивные клетки проявляют более интенсивную окраску на иммуноглобулины, чем опухолевые клетки.
Несмотря на то, что укорочение легкой цепи достоверно может быть идентифицировано в клетках, экспрессирующих цитоплазматический Ig, идентификация поверхностных легких цепей вызывает затруднение (исключение составляют хорошо фиксированные ткани). По этой причине иммуноглобулин не всегда может использоваться в качестве достоверного маркера малых В-клеток в заключенных в парафин тканях.
Поверхностный IgD можно выявить в хорошо фиксированных, заключенных в парафин тканях. Реактивные мантийные клетки являются позитивными, что имеет место в большинстве случаев лимфомы из малых лимфоцитов (CLL/SLL) и лимфомы из клеток мантии.
CD20 является негликозилироваипым фосфопротеином, экспрессируемым на мембране В-клеток. В действительности он не является идеальным маркером В-клеток, несмотря на широкое признание в таком качестве, т. к. не экспрессируется на самых ранних стадиях дифференцировки В-клеток и исчезает при трансформации В-клеток в плазмоциты. Поэтому он отсутствует во многих В-лимфобласт-ных лимфомах и плазмоцитарпых опухолях. Окрашивание на CD20 должно определяться на клеточной мембране; цитоплазматическое, ядерное и ядрышковое окрашивание являются неспецифичными.
Поскольку CD20 является поверхностным мембранным антигеном, он часто сильнее окрашивается в биоптатах, имеющих некоторую степень артефактного сморщивания и может оказаться менее сильно окрашенным в хорошо фиксированных тканях, таких как пункционные биопсии.
Имеются немногочисленные сообщения о выявлении CD20 в Т-клеточных лимфомах. Он экспрессируется также на эпителиальных клетках тимомы (однако следует проявлять осторожность при диагностике медиастинальной крупноклеточной В-лимк а-цепи молекулы (CD79a) являются почти идеальным маркером линии В-клеток, так как CD79a экспрессируется на всех этапах их дифференцировки. Следует, однако, отметить, что CD79a экспрессируют 50 % Т-лимфобластных лимфом. Окрашивание на CD79a является цитоплазматическим и интенсивно выражено па плазмоцитах. CD79a более интенсивно экспрессируется на мантийных клетках, чем на клетках центров размножения.