Исследование ретракции сгустка, тест Biggs-Douglas - методика, показатели нормы
Принцип анализа ретракции сгустка. Оценка активности тромбоцитов на последней фазе свертывания, посредством измерения тромбодинамического действия фактор 7 тромбоцитов (тромбостенина) на сгусток фибрина. В целях устранения фактора погрешности, связанного с наличием эритроцитов, описанный метод измеряет ретракцию сгустка в плазме со стандартным числом тромбоцитов.
Техника анализа ретракции сгустка (Поппа-Энаке). В пробирку 16/160 мм налить перечисляемые реагенты, в следующем порядке: 3,4 мл физиологического раствора; 1,5 мл рабочей плазмы; 0,1 мл раствора тромбина.
Раз опрокинуть пробирку затем поставить на штатив и подождать до свертывания содержимого, явление, происходящее примерно за 20—30 сек. Продержать час в ванне при 37°С. За этот интервал отслоить сгусток два раза: первый раз спустя 2 мин., а второй раз спустя 10 мин. с момента погружения в ванну.
Отслойку проводить вкруговую, с помощью тонкой палочки, или плавным встряхиванием.
После часовой инкубации тонким пинцетом захватить сгусток, легко провести им по стенке пробирки и выбросить (во время этих приемов не выжимать сгусток!). Отмерить оставшуюся жидкость с помощью градуированного цилиндра на 5 мл. или 10 мл.
Расчет ретракции сгустка. Прочитанную на цилиндре цифру (в мл) помножить на 20; получим показатель ретракции сгустка в процентном выражении.
Результаты исследования ретракции сгустка. Норма более 85%.
Тест Biggs-Douglas
Принцип метода Biggs-Douglas заключается в измерении скорости образования и количества внутренней протромбиназы, которая порождается в лишенной протромбине системе, состоящей из адсорбированной плазмы, сыворотки и тромбоцитной взвеси, после инкубации с СаСl2. Свертывающая активность этой смеси можно измерить путем ее влияния на к.-л. субстрат, в состав которого входят факторы II и I. Нормальные значения времени свертывания после 8-минутной инкубации колеблятся от 8 до 12 сек.
Этим испытанием исследуется функция тромбоцитов, когда в системе используются плазма и сыворотка контрольного лица в норме и тромбоцитная взвесь от исследуемого больного. Длительное время указывает на пониженную функциональную способность данных тромбоцитов.
