Гематология
  Домой Медицинский фото атлас Психология отношений Медицинские видео ролики Медицинская библиотека Консультация врача  
Гематология:
Гематология
Физиология крови
Методы исследования
Анемии
Острые лейкозы
Миелодиспластические синдромы (МДС)
Хронические лейкозы
Лимфомы
Гистиоцитозы - гистиоцитоз Х
Макроглобулинемии
Коагулопатия
Патология тромбоцитов
Переливание крови
Трансплантация стволовых клеток
Книги по гематологии
Иностранные книги по гематологии
Рекомендуем:
Остальные разделы:
Абдоминальная хирургия
Анатомия человека
Акушерство
Биология
Генетика
Гепатология
Гигиена труда
Гинекология
Гистология
Дерматология
Оз и Оз
Кардиология
Лучевая медицина
Микробиология
Неврология
Неотложная хирургия
Отоларингология
Офтальмология
Профилактика заболеваний
Психология
Пульмонология
Физиология человека
Скорая помощь
Стоматология
Топографическая анатомия
Травматология
Фармакология
Необходимое:
Книги по медицине
Видео по медицине
Фотографии по медицине
Консультации врачей
Форум
 

Электрофорез гемоглобина на уксуснокислой целлюлозе - методика, показатели нормы

Электрофорез на уксуснокислой целлюлозе составляет быстрый и чувствительный метод. Отделяет как физиологические, так и патологические фракции, даже если они находятся в очень малой концентрации.

Материал для электрофореза гемоглобина на уксуснокислой целлюлозе: буфер трис-ЭДТА-борная кислота [трис (гидроксиметиламинометан) 14,50; 1,50 г ЭДТА (келатон 2); 0,90 г. борной кислоты; до 1000 мл дистилированной воды; 2% раствор цианида натрия; ленты уксуснокислой целлюлозы (сепрафор III, целаграмм, целлогель и пр.)].

Методы для электрофореза гемоглобина на уксуснокислой целлюлозе

Ленты ацетата погрузить в буфер, затем протампонировать между двумя кусками фильтровальной бумаги и растянуть на опорную пластинку аппарата для электрофореза. Рама погружается в ванну для электрофореза. Для лучшего соединения с буфером на края лент ацетата наложить полоску фильтровальной бумаги Ватмана.

Спустя 10 минут после погружения в ванну с помощью капиллярной трубки нанести на отрицательный полюс каждой ленты образец гемоглобина, в виде очень узенькой полоски. Когда ленты широкие, можно нанести несколько образцов. Гемоглобин наносится в виде цианметгемоглобина (5—6 капель раствора гемоглобина на 1 каплю цианида). Подвергнуть двухчасовой миграции, при напряжении 200 в и ампераже 0,5 ма/см.

электрофорез гемоглобина

При таких условиях работы возможно отделить нормальные фракции гемоглобин — А1 и А2, равно как и все патологические фракции гемоглобина, иной электрической зарядки, чем нормальный гемоглобин.

Элюцию фракций проводить, без окраски, в буфере трис. Что касается гемоглобина А2 и контрольного препарата элюцию делать в 3 мл буфера, в то время как для гемоглобина А1 использовать 15 мл буфера. В отношение патологи-гических фракций объем вещества для элюции определить в зависимости от количества аномального гемоглобина.

Через 30 мин. после элюции, прочитать результат, с помощью Спеколя или спектрофотометра, при длине волны 415 нм. При расчете учитывать объемы, использованные для элюции, в том смысле что полученный, в отношение гемоглобина А1 результат следует помножить на 5.

Сумма экстинкций, составляющая 100%, экстинкция каждой фракции деленная на общую экстинкцию, дает, в процентном отношении, значение соответствующей фракции. По этому методу нормальные значения для гемоглобина А2 колеблятся между 1,5—2,5%.

Если по какой-либо частной причине ленты следует окрасить то, после промывания, на лентах помимо нормальной и патологических фракций появляются две белковые негемоглобинные фракции, располагающиеся позади гамоглобина А2, представляющие собой угольные ангидразы b и c.

- Читать далее "Определение щелочноустойчивого гемоглобина - методика"


Оглавление темы "Лабораторная диагностика в гематологии":
  1. Техника пункции костного мозга - получения материала для миелограммы
  2. Исследование костного мозга - миелограмма
  3. Исследования обмена железа радиоактивным железом Fe59
  4. Методика определения объема крови и массы эритроцитов
  5. Исследование продолжительности жизни эритроцитов - норма
  6. Исследование продолжительности жизни тромбоцитов - норма
  7. Отбор, приготовление и хранение проб крови при гемоглобинопатиях
  8. Электрофорез гемоглобина в блоке крахмала - методика, показатели нормы
  9. Электрофорез гемоглобина на уксуснокислой целлюлозе - методика, показатели нормы
  10. Определение щелочноустойчивого гемоглобина - методика
Загрузка...

   
MedUniver.com
ICQ:493-344-927
E-mail: reklama@meduniver.com
   

Пользователи интересуются:

Будем рады вашим вопросам и отзывам:

Полная версия сайта