Материал для исследований — кровь, моча, СМЖ, гнойное отделяемое и др.
Цель бактериологического анализа — определение антигенных свойств бактерий кишечной палочки, а не изучение их биохимических признаков, проводимое дополнительно для установления родовой принадлежности.
• Первоначально проводят микроскопию мазков кишечной палочки, окрашенных по Граму, и выполняют посев на селективно-дифференцирующие среды.
• Биохимическую активность кишечной палочки определяют с помощью стандартных наборов либо проводят исследования на минимальном дифференцирующем ряду.
• Из изолированных колоний кишечной палочки готовят и микроскопируют мазки, ставят оксидазный тест и пробную РА с поливалентными ОК-антисыворотками (ОКА, ОКБ, ОКС, ОКД и ОКЕ). Последовательно используя весь набор ОК-антисывороток, определяют принадлежность живой культуры к ОК-группе.
Культура кишечной палочки не подлежит дальнейшему исследованию при наличии агглютинации с несколькими сыворотками. Затем определяют принадлежность к О-группе в РА с прогретой при 100 °С культурой (для разрушения К-Аг) и адсорбированными О-антисыворотками.
• В клинических лабораториях иногда выделяют практически чистые культуры кишечной палочки (например, из мочи), тогда исследовании ограничивают определением роста на среде Плоскирева и способности к образованию индола.