Культуральные свойства дифтерийной палочки. Культуральные особенности биоваров дифтерии. Биохимическая активность палочки Клебса-Лёффлера. Бактериоцины дифтерии.
Культуральные свойства дифтерийной палочки. Дифтерийная палочка хорошо растёт при 36-37 °С; оптимум рН 7.4-8,0. Питательные среды должны содержать аминокислоты, витамины, ионы металлов (Са2+, Mg2+ Fe2+ и др.), играющие роль ростовых факторов. На сывороточных средах (например, среде Лёффлера) дают рост уже через 10-12 ч; за это время контаминирующая микрофлора обычно не успевает развиться. Наибольшее распространение получили среды с теллуритом, так как возбудитель резистентен к высоким концентрациям теллурита калия или натрии, ингибирующим рост сопутствующей микрофлоры.
На таких средах дифтерийная палочка образует серовато-чёрные колонии в результате восстановления теллурита до металлического теллура, аккумулирующегося внутри бактерий (рис. 8, см. цветную вклейку). В жидких средах образуют помутнение и осадок; их образование и характер варьируют у различных биоваров.
Биохимическая активность дифтерии
Палочка Клебса-Лёффлера сбраживает с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, галактозу, декстрин; не разлагает сахарозу, лактозу, маннит. Способность разлагать крахмал и гликоген варьирует у различных штаммов, что используют для внутривидовой дифференцировки.
Дифтерийная палочка не гидролизует мочевину и не образует индол. Отсутствие способности ферментировать сахарозу и разлагать мочевину — дифференцирующий признак, отличающий дифтерийную палочку от других коринебактерий. Другой дифференцирующий признак — способность разлагать цистин. С. diphtheriae продуцирует каталазу, гиалуронидазу, нейраминидазу, ДНКазу, уреазу и др.
Цистиназная активность — дифференцирующий признак дифтерийной палочки. Дифтерийная палочка лизирует эритроциты морской свинки и кролика.
Культуральные особенности биоваров дифтерии
Свойства
Биовар дифтерии gravis
Биовар дифтерии intermedius
Биовар дифтерии mitis
Рост на средах с теллуритом
Крупные сухие матовые плоские серо-чёрные колонии приподняты в центре, радиальная исчерченность («маргаритки») и неровные края
Мелкие сухие матовые серо-чёрные колонии с более прозрачной периферией, поднятым центром и неровными краями
Мелкие гладкие блестящие полупрозрачные чёрные колонии с ровными краями
Рост на бульоне
Плёнка, помутнение (иногда отсутствует), крошковидный или крупнозернистый осадок
Помутнение с последующим просветлением и образованием мелкозернистого осадка
Равномерное помутнение и порошкообразный осадок
Гемолиз на кровяных средах
±
-
+
Биовары возбудителя дифтерии существенно различаются по культуральным и биохимическим свойствам. Среди дифференциально-диагностических биохимических тестов наиболее часто учитывают различия в способности разлагать углеводы и мочевину.
Бактериоцины дифтерии
Дифтерийная палочка образует бактериоцины (корицины), обладающие узким спектром действия. Гены, кодирующие синтез бактериоцинов, передаются плазмидами. Бактериоцины дифтерийной палочки образуют как токсигенные, так и нетоксигенные штаммы.