Реакция радиального гемолиза в геле. Реакция локального гемолиза в геле. Унитиоловая проба.
Реакция радиального гемолиза в геле — вариант РСК. Принцип реакции основан на иммобилизации комплемента и Аг (эритроциты барана) в агаровом геле. Затем в геле нарезают лунки и вносят AT (например, гемолитическую сыворотку). Диффундирующие AT связывают Аг и комплемент, что проявляется появлением зон гемолиза. Их размеры пропорциональны титрам AT в сыворотке. В диагностических целях эритроциты барана «нагружают» Аг различных возбудителей (например, вирусов гриппа, краснухи), а в лунки вносят сыворотку больных
Реакция локального гемолиза в геле
Реакция локального гемолиза в геле предложена Н. Йерне и А. Нордином (1963). Принцип аналогичен реакции радиального гемолиза, но в гель вносят эритроциты барана и суспензию клеток-антителопродуцентов. Последние секретируют AT, диффундирующие в агар и фиксирующиеся на эритроцитах. Затем в реакционную систему вносят комплемент (наслаивая его на агар) и наблюдают образование зон гемолиза вокруг каждой клетки, образующей AT к эритроцитам барана, Метод получил широкое распространение во многих областях иммунологии, так как даёт возможность оценивать образование AT на уровне отдельных тканей и клеточных популяций после различных воздействий. Метод позволяет определять динамику образования антителообразующих клеток к различным Аг, связывая их с эритроцитами, а также определять классы образуемых Ig.
Унитиоловая проба
Определение принадлежности AT к тому или иному классу Ig имеет большое диагностическое значение, так как позволяют определить фазу инфекционного процесса. На базе классических серологических реакций доступна унитиоловая проба, в основу которой положена способность унитиола расщеплять дисульфидные(S-S) мостики в молекулах IgM, но не IgG. Первоначально в порции сыворотки определяют общие титры AT (например, в РНГА), затем в неё вносят унитиол и после инкубации снова определяют титры AT. Разницу между титрами первого и второго измерения составляют титры IgM.
