Реакция Кумбса. Выявление неполных антител ( AT ). Метод латекс-агглютинации. Реакция латекс-агглютинации.
Реакция Кумбса. Метод выявляет неполные (одновалентные) AT, образующиеся при бруцеллёзе, резус-конфликте или системных коллагенозах. Реакция также известна как антигло-булиновый тест. Для постановки реакции необходима антиглобулиновая сыворотка, содержащая полные (как минимум двухвалентные) AT.
Неполные AT предварительно инкубируют с корпускулярным Аг и вносят антиглобулиновую сыворотку. Одна молекула полных AT взаимодействует с двумя молекулами неполных AT, связавших Аг, в результате происходит видимая агглютинация или гемагглютинация (рис. 10-15).
Рис. 10-15. Выявление неполных антител ( AT ) (проба Кумбса). Соединение неполных AT (А) с Аг (Б) не вызывает агглютинации (1). Добавление антиглобулиновой сыворотки (В) приводит к появлению видимой агглютинации (2).
Метод латекс-агглютинации. В последние годы ассортимент диагностикумов из убитых микробов дополнили так называемые суспензионные Аг и AT, сорбированные на различных инертных корпускулярных носителях. Среди них наибольшее распространение нашёл метод латекс-агглютинации, основанный на взаимодействии Аг (или AT) в образце с частицами латекса, нагруженными специфическими моноклональными AT (или Аг), что ведёт к быстрому образованию видимых агрегатов.
Учёт результатов проводят через 10-15 мин при косом освещении на тёмном фоне. Разработаны коммерческие диагностикумы для выявления Аг Streptococcus pneumoniae, стрептококков группы В, Haemophilus influenzae типа b и капсулированных штаммов менингококка в различных тканевых жидкостях (СМЖ, сыворотке крови, моче). Также имеются наборы для выявления Аг стрептококков группы А в мазках из зева; для первичной экспресс-идентификации колоний стрептококков групп А, В, С, F, энтерококков, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae типов a-f, золотистого стафилококка, Neisseria meningitidis и Neisseria gonorrhoeae.
Видео методика проведения непрямой пробы Кумбса (на примере ID diacell 1-2-3 Bio-Rad)