Еще один тип электронного микроскопа — это сканирующий электронный микроскоп, в котором пучок электронов последовательно перемещается от точки к точке по поверхности объекта, а отраженные от поверхности электроны собираются и формируют изображение наподобие того, какое возникает на экране телевизора.
Преимущества сканирующего электронного микроскопа:
1) видны детали строения поверхности;
2) детали видны с большей глубиной резкости, т. е. большая часть образца одновременно находится в фокусе. Это создает удивительный эффект трехмерности;
3) можно работать с образцами большего размера, чем в трансмиссионном электронном микроскопе.
Недостаток сканирующего электронного микроскопа:
1) разрешающая способность (5—20 нм) ниже, чем у трансмиссионного электронного микроскопа (0,5 нм).
Фракционирование клеток
Микроскопическая техника вносит огромный вклад в изучение клетки. Однако, когда речь идет о выявлении функций отдельных органелл, необходимы еще и различные другие методы исследования.
Обычно, для того чтобы определить функцию той или иной органеллы, нужно отделить данную органеллу от других клеточных компонентов и заставить ее выполнять эту функцию in vitro. Для этого клетки разрушают (гомогенизируют), поместив их в подходящую среду (с надлежащим рН, ионным составом и температурой).
Проделать это можно с помощью обычного миксера. Полученную смесь подвергают центрифугированию. Чем больше число оборотов центрифуги, тем более мелкие частицы осаждаются. Центрифугирование проводят в несколько приемов, постепенно увеличивая скорость.
После каждого центрифугирования надосадочную жидкость отделяют от осадка, чтобы вновь подвергнуть ее центрифугированию. Каждый последующий осадок содержит все более мелкие органеллы. Такая методика известна как дифференциальное центрифугирование. Для достижения высоких скоростей требуется особая центрифуга, ее называют ультрацентрифугой.
