MedUniver Микробиология
  Домой Медицинский фото атлас Психология отношений Медицинские видео ролики Медицинская библиотека Консультация врача  
Микробиология:
Общая микробиология
Общая бактериология
Экология микробов
Учение об инфекции
Лечение инфекций
Иммунология
Методы диагностики
Грам "+" бактерии
Грам "-" бактерии
Микобактерии
Хламидии. Риккетсии
Спирохеты. Трепонемы
Вирусы
Грибы
Простейшие
Гельминтозы
Санитарная микробиология
Книги по микробиологии
Рекомендуем:
Необходимое:
Книги по медицине
Видео по медицине
Фотографии по медицине
Консультации врачей
Форум
 
Оглавление темы "Посев бактерий. Методы культивирования бактерий. Признаки колоний.":
1. Посев бактерий. Посев бактерий на плотные питательные среды. Получение изолированных колоний бактерий. Температура культивирования бактерий.
2. Состав газовой среды бактерий. Посев аэробных бактерий. Посев анаэробных бактерий. Метод Фортнера. Метод Цейсслера. Метод Вейнберга.
3. Методы культивирования бактерий. Стационарный способ культивирования бактерий. Способ глубинного культивирования бактерий. Метод проточных сред.
4. Первичная идентификация бактерий. Гемолиз. Гемолизины бактерий. альфа-Гемолиз. бета-Гемолиз.
5. Признаки колоний. Размеры колоний. Форма колоний. Форма краёв колоний. Диссоциации колоний. Цвет колоний.
6. Консистенция колоний бактерий. Особенности роста колоний на среде. Мягкие колонии бактерий. Твёрдые колонии. Запах колоний бактерий.
7. Биохимические методы идентификации бактерий. Способность к ферментации углеводов у бактерий. Пёстрый ряд при диагностике бактерий. Расщепление белков бактериями.
8. Тест на нитратредуктазную активность бактерий. Хроматография при идентификации бактерий. Индикаторные бумажки для идентификации бактерий.
9. Автоматические системы идентификации бактерий. Системы Microscan. Системы Vitek. Методы идентификации нуклеиновых кислот. Гибридизация нуклеиновых кислот.
10. Схема гибридизации нуклеиновых кислот. Полимеразная цепная реакция ( ПЦР ). Серологические методы диагностики бактерий. Аллергологические методы диагностики бактерий.

Схема гибридизации нуклеиновых кислот. Полимеразная цепная реакция ( ПЦР ). Серологические методы диагностики бактерий. Аллергологические методы диагностики бактерий.

Метод гибридизации нуклеиновых кислот в растворах даёт наиболее быстрые результаты (рис. 11-18, А). Широкому внедрению метода препятствует проблема удаления несвязавшихся нитей нуклеиновых кислот.

Метод гибридизации нуклеиновых кислот на твёрдой основе (рис. 11-18, Б) и его сэндвич-модификация (рис. 11-18, В) распространён больше. В качестве твёрдой основы служат мембраны из нитроцеллюлозы или нейлона. Несвязавшиеся реагенты удаляют многократным отмыванием.

Схема гибридизации нуклеиновых кислот. Полимеразная цепная реакция ( ПЦР ). Серологические методы диагностики бактерий
Рис. 11-17. Схема гибридизации нуклеиновых кислот.

Полимеразная цепная реакция ( ПЦР )

Основу метода ы составляет катализируемое ДНК-полимеразой многократное образование копий определённого участка ДНК. Первоначально проводят отжиг — термическое разделение двухнитевой молекулы ДНК на отдельные цепочки. Затем среду охлаждают и вносят праймеры (затравки), комплементарные нуклеотидным последовательностям обеих цепочек. Для запуска реакции применяют синтетические праймеры — олигонуклеотиды, состоящие из 10-20 нуклеоти-дов (например, дезоксинуклеотидтрифосфат), взаимодействующие с окончаниями последовательностей и образующие последовательности в 50-1000 оснований. Затем в среду вносят термостабильную tag-полимеразу (по названию бактерии Thermits aquaticus), что запускает образование вторичных копий цепей ДНК, после чего образующиеся двухнитевые молекулы ДНК снова подогревают. Образующиеся отдельные цепочки остужают, вносят праимеры и снова повторяют процедуру подогрева и охлаждения; поскольку tag-полимераза термостабильна, то необходимость в её повторном внесении отсутствует (рис. 11-19). ПЦР позволяет получить большие количества изучаемого фрагмента ДНК даже в том случае, если в распоряжении исследователя имеется всего лишь одна исходная молекула геномной ДНК. Идентификацию копий ДНК проводят методом электрофореза. Метод полимеразной цепной реакции ( ПЦР ) лежит также в основе ДНК-идентификации личности, установления родства людей, выявления генов наследственных болезней и пр.

Схема гибридизации нуклеиновых кислот. Полимеразная цепная реакция ( ПЦР ). Серологические методы диагностики бактерий
Схема гибридизации нуклеиновых кислот. Полимеразная цепная реакция ( ПЦР ). Серологические методы диагностики бактерий
Рис. 11-18. Гибридизация нуклеиновых кислот: в растворах (А), на твёрдой основе (Б), сэндвич-гибридизация (Б)

Серологические методы диагностики бактерий

Классические серологические реакции применяют для выявления бактериальных AT, а также для выявления Аг, особенно для идентификации бактериальных Аг. Среди современных методов наибольшее распространение нашли методы твердофазного ИФА и латекс-агглютинации.

Схема гибридизации нуклеиновых кислот. Полимеразная цепная реакция ( ПЦР ). Серологические методы диагностики бактерий
Рис. 11-19. Схема ПЦР. дНТФ — дезоксинуклеотидтрифосфат

Аллергологические методы диагностики бактерий

Сенсибилизирующей активностью обладает ограниченное количество бактериальных Аг. Поэтому метод кожных проб применяют лишь при диагностике туберкулёза, сапа, мелиоидоза, бруцеллёза и туляремии.

- Вернуться в оглавление раздела "Микробиология."

Загрузка...

   
MedUniver.com
ICQ:493-344-927
E-mail: reklama@meduniver.com
   

Пользователи интересуются:

Будем рады вашим вопросам и отзывам:

Полная версия сайта