МедУнивер - MedUniver.com Все разделы сайта Видео по медицине Книги по медицине Форум консультаций врачей  
Рекомендуем:
Пульмонология:
Пульмонология
Болезни бронхов
Болезни легких
Воспаление в легких
КТ легких
Обследование легких
Туберкулез
УЗИ легких и плевры
Форум
 

Определение липопротеидов крови. Определение глюкопротеидов крови

Для определения липопротеидов используется тот же буфер, что и для электрофореза. Ленты готовят так же, как и для белковых фракций.
В качестве красителя применяется судан черный: 25 мг судана черного на 10 мл абсолютного спирта. Срок годности такого раствора 1 месяц, хранят его в холодильнике.

Электрофорез липопротеидов производят заранее окрашенной сывороткой. Для этого к 0,5 мл свежей, негемолизированной сыворотки добавляют 0,1 мл Судана черного. Смесь перед нанесением на бумагу 1 час взбалтывают, затем наносят на 0,1 мл смеси. Ленты помещают в камеру на 3 часа при напряжении 300 в, пока происходит разделение фракций. Ленты вынимают и сушат в горизонтальном положении при температуре 80°. Затем разрезают фракции для количественного определения. Разрезанную по фракции ленту помещают в пробирку и заливают 20% уксусным спиртом по 5 мл в каждую (20 мл уксусной кислоты и 80 мл спирта). Закрывают пробирки пробками и ставят в темное место на 2 часа. Раствор колориметрируют в ФЭК с синим светофильтром в 5-миллиметровой кювете. Полученные цифры суммируют и принимают за 100%. Вычисляют процентное содержание каждой фракции. В норме получают 30% (26—35%) альфа-липопротеидов и 70% (74—65%) бета-липопротеидов.

Определение глюкопротеидов крови

Электрофорез производят так же, как при разделении белков. Для определения глюкопротеидов необходимы следующие реактивы.
Реактивы: I. 1% раствор HJO4 (йодная кислота) хранить в холодильнике одну неделю.

липопротеиды крови

II. Восстанавливающий раствор готовят по методу Грина: 50 кг KJ (йодистый калий) и 50 г гипосульфита растворяют в 1 л Н20 (раствор А), 35 мл IN раствора доводят до 1 л дистиллированной Н20 (раствор В). Перед употреблением сливают две части раствора А и 3 части раствора В.

III. Реактив Шиффа. 4г основного фуксина (специальный сорт для реактива Шиффа) растворяют в 1 л дистиллированной воды, нагретой до 90—95°. Раствор тщательно перемешивают до тех пор, пока его температура не достигнет 40°. После этого к раствору фуксина прибавляют 8 г метабисульфита К и 10 мл концентрированной соляной кислоты. Раствор оставляют в плотно закрытой склянке на 16—18 часов, затем к нему прибавляют 2 г активированного угля, тщательно перемешивают и отфильтровывают на воронке Бюхнера. Раствор должен быть абсолютно прозрачным и бесцветным. Хранить его следует в холодильнике и использовать не более одного месяца.

IV. Раствор для промывания электрофореграмм. 16 г метабисульфита К растворяют в 2 л Н20. К 500 мл этого основного раствора прибавляют 10 мл концентрированной соляной кислоты (раствора А). К остающемуся 1,5 л основного раствора прибавляют 15 мл концентрированной соляной кислоты (раствор В). Раствор готовят непосредственно перед употреблением. Наилучшие результаты были получены при окислении в течение 10 минут 1% раствором йодной кислоты. В этих условиях получается яркая окраска фракций глюкопротеидов и бесцветный фон.

- Также рекомендуем "Окраска электрофореграмм крови. Общий белок крови при патологии легких"

Оглавление темы "Обследования в пульмонологии":
1. Противопоказания к медиастиноскопии. Диагностическая торакотомия
2. Показания к диагностической торакотомии. Иммунология заболеваний легких
3. Белковые фракции сыворотки крови. Техника выделения фракций белков крови
4. Определение липопротеидов крови. Определение глюкопротеидов крови
5. Окраска электрофореграмм крови. Общий белок крови при патологии легких
6. Определение фагоцитарной активности лейкоцитов. Определение С-реактивного белка крови
7. Совершенствование диагностики заболеваний легких. Специальные методы исследования в пульмонологии
8. Бронхологические исследования в пульмонологии. Ангиография в пульмонологии
9. Нормальное средостение. Ориентиры средостения
10. Расположение блуждающего нерва. Лимфатическая система средостения
Медунивер Мы в Telegram Мы в YouTube Мы в VK Форум консультаций врачей Контакты, реклама
Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.