Для определения региональной принадлежности эпителиальных клеток в следах большое значение имеет исследование полового хроматина, как признака, по которому можно установить происхождение клеток от лиц разного пола. Мазки -отпечатки помещают в закрытый сосуд над бюксом с 5—10% спиртовым раствором йода на 10—15 мин.
Выявить гликоген можно также, поместив между двумя отпечатками полоску фильтровальной бумаги, смоченную раствором йода. Препарат исследуют сразу после окрашивания, потому что через несколько часов окраска значительно бледнеет. При необходимости ее легко восстановить вышеуказанными способами.
Микроскопическое исследование производят с объективом 20X при закрытой апертурной диафрагме. Гликогенсодержащие клетки хорошо видны на бесцветном или слабом желтом фоне. Они выделяются насыщенным коричневым (кирпичным) цветом цитоплазмы, которая равномерно заполнена окрашенными пылевидными гранулами гликогена; ядра остаются бесцветными, однако контуры их различимы.
Наряду с гликогенсодержащими клетками учитывают количество клеток (с ядрами), не содержащих гликоген. Расположение клеток в препарате схематически изображают в рабочем журнале, чтобы найти их повторно для изучения других признаков.
После исследования на гликоген отпечаток фиксируют 10 мин в метиловом (100% этиловом) спирте и окрашивают азур-эозином. При мпкроскопировании применяют объективы 20X и 90Х.
На окрашенном препарате можно обнаружить различные клетки: безъядерные (из верхних слоев эпидермиса), эпителиоциты переходного эпителия, лейкоциты, сперматозоиды, клетки вагинального эпителия. Безъядерные клетки эпидермиса могут быть одиночными, в небольшом количестве или заполнять все поле зрения.
Они могут быть и в виде клеточных групп или фрагментов слоя толщиной в один ряд и более. Их присутствие облегчает ориентирование в препарате, особенно при малом количестве клеточных элементов. Среди клеток с ядрами обращают на себя внимание прежде всего клетки покровного слоя переходного эпителия.
Они выделяются крупными размерами, четкими округлыми контурами, имеют сферическое ядро, расположенное в центре. Хроматин в них имеет характерный зернистый рисунок, наиболее выраженный у ядер поверхностных клеток. В скоплении таких клеток прежде всего можно отметить сходство их между собой (изоморфность).
Рядом с ними могут обнаруживаться клетки из нижних рядов переходного эпителия овоидной н сферической формы, с плотными интенсивно окрашенными ядрами и голубой цитоплазмой. Вокруг клетки или небольших скоплений их, как правило, наблюдается некоторое количество лейкоцитов. Они имеют хорошо сохранившийся вид, как в мазке крови, что позволяет предполагать их происхождение из отделяемого мужской уретры, а не из следов женской крови.
Вагинальные клетки в отпечатках имеют различный вид в зависимости от степени сжатия, деформации, а также происхождения из того или другого слоя. В отличие от клеток уретры вагинальные клетки характеризуются большей деформацией и подиморфизмом. Клетки поверхностного слоя в препаратах встречаются в изолированном виде или в скоплениях.
Они представляют собой овальные или многоугольные пластинки с очень мелкими (точечными) ядрами, окрашивающимися гомогенно почти в черный цвет. Клетки нижних рядов этого слоя имеют овоидные ядра с различимой структурой хроматина. Промежуточные клетки отличаются большей толщиной протопласта, особенно вблизи ядра, и чаще встречаются в виде групп из нескольких клеток, границы которых плохо различимы. Их крупные овоидные ядра, расположенные несколько эксцентрично, имеют сетчатую структуру хроматина.
При исследовании морфологии клеток, похожих на вагинальные, учитывают наличие в них Х-хроматина. Учету подлежат только те клетки, в которых сохранилась структура ядра. При необходимости клетки в препаратах-отпечатках могут быть исследованы на наличие Y-хроматина. С этой целью можно окрасить флюорохромом весь препарат или только часть препарата, где расположены клетки, представляющие интерес для такого исследования.
В последнем случае все реактивы наносят последовательно по каплям на выбранный участок. После окраски препарат накрывают покровным стеклом и исследуют под люминесцентным микроскопом.
