Диагностика половой принадлежности тканей. Оценка результатов исследования тканей
Микроскопическое исследование препаратов, приготовленных из различных тканей частей трупа или частиц органов человека, проводят в том же порядке, как и препаратов, приготовленных из следов крови, слюны и волос.
Для выявления Y-хроматина необходимо выбирать наиболее тонкие участки ткани, где клетки лежат в один-два слоя. В более толстых участках Y-хроматин можно не увидеть из-за сильного свечения всего фрагмента ткани. Целесообразно учитывать клетки и ядра, лежащие изолированно, если структура их достаточно сохранена. Менее удобно исследовать Y-хроматнн в тканях, бедных клеточными элементами, таких, как плотная волокнистая ткань, хрящ, кость.
Из-за яркого свечения межклеточного вещества и относительно большой толщины получаемых препаратов свечение Y-хроматипа удается различить лишь в некоторых клетках, расположенных поверхностно или по краю. В изолированных клетках этих тканей и клетках, лежащих в один слой, Y-хроматин виден хорошо.
Если Y-хроматин не обнаружен, препараты окрашивают азур-эозиновой смесью и анализируют ядра на наличие Х-хроматина.
В отпечатках, соскобах и давленых препаратах при правильной окраске азур-эозпном ядра изолированных и лежащих в один слой клеток фиолетовые или розово-фиолетовые, цитоплазма розовая, реже голубая. Ядра в многослойных участках окрашиваются интенсивно в сине-фиолетовый или темно-синий цвет, а цитоплазма — в синий. Х-хроматин следует искать прежде всего в правильно окрашенных клетках, сохранивших структуру, близкую к той, которую они имеют в свежей ткани. В отобранных таким образом клетках отмечают количество клеток с Х-хроматинположительными ядрами.
Анализируя в трупных тканях (эпителиальной, нервной, мышечной, соединительной) только ядра с сохранившейся структурой, можно отметить, что максимальная частота телец, подобных Х-хроматину у мужчин и Y-хроматину у женщин, не превышает 6% (вариации частот соответственно 0—5% и 0—6%). Минимальная частота Х-хроматина у женщин и Y-хроматина у мужчин не ниже 20% (вариации частот соответственно 23—82% и 55—93%). Эти данные согласуются с показателями для клеток крови и слюны в следах, а также волос.
Поэтому для судебно-цитологической диагностики половой принадлежности частей трупа и частиц тканей (органов) человека пользуются критериями, вычисленными ранее для эпителиальных клеток слюны в следах и волос.
Из левой половины таблицы следует, что при исследовании на Х-хроматин женский пол может быть установлен минимум по 3 клеткам, если все они содержат Х-хроматин. Три Х-хроматинположительных ядра могут также указывать на женский пол, если они обнаружены при анализе не более чем 4 первых клеток. Этот минимальный критерий можно использовать для диагностики мужского пола при исследовании клеток на Y-хроматин.
Ниже даны числовые соотношения клеток с половым хроматином и без него для диагностики пола в тех случаях, когда по минимальному критерию сделать это не удается. В правой половине таблицы даны числовые соотношения для диагностики пола на основании отсутствия полового хроматина или при минимальном его значении — как неспецифического признака. Мужской пол можно установить на основании отсутствия Х-хроматина в 25 исследованных клетках. Точно так же в результате исследования 25 клеток, не содержащих Y-хроматин, может быть диагностирован женский пол.
Если диагностика по минимальному критерию не удалась и среди 25 исследованных клеток найдена одна, содержащая структуру, подобную половому хроматину, необходимо продолжить анализ клеток до 35 и т. д.