Задачи цитологического исследования. Установление природы частиц
Другим методическим важным вопросом являются количественные критерии диагностики половой принадлежности объектов. В литературе имеются рекомендации исследовать не менее 100 клеток и по процентному содержанию ядер с половым хроматином определять, от мужчины или женщины они произошли.
На практике использовать эту рекомендацию не всегда возможно из-за ограниченного количества клеток, которые могут сохраниться в объектах. Поэтому необходимо было уточнить данные о частоте полового хроматина в трупных тканях и решить вопрос о критериях диагностики по минимальному в каждом случае числу клеток (Антонова С. Н., 1977).
При расследовании уголовных дел, связанных с преступлениями против жизни и здоровья человека, часто возникает необходимость в исследовании на предполагаемом орудии травмы (или других предметах) частиц, похожих на ткани (органы). Как правило, предположение об их происхождении от человека возникает в связи с тем, что они располагаются в следах крови. Размеры объектов могут быть различны, от небольших кусочков до мелких частиц.
Цитологическое исследование назначается с целью установления тканевой и половой принадлежности частиц. Эти вопросы решаются после установления их видовой, а при необходимости и групповой принадлежности. Однако встречаются частицы, по виду которых нельзя определить их природу (происходят ли они из организма животного, человека; имеют ли растительное происхождение или небиологическое).
В таких случаях иммунологическому исследованию должно предшествовать решение этого вопроса цитологическим методом. Он позволяет установить клеточное строение частиц биологического происхождения, а также дифференцировать клетки растительные от клеток человека (животного).
Установление природы частиц
Поступившие на экспертизу частицы помещают в низкие бюксы или чашки Петри с соответствующими надписями и исследуют под стереомпкроскопом при увеличении 12,5—25. Частицы, находящиеся на предмете-носителе, перед этим осторожно снимают, контролируя изъятие с помощью стереомикроскопа.
Как правило, частицы тканей (органов) животных и человека светлые (бесцветные) или окрашены в желтые и бурые тона из-за присутствия в них крови; характерным признаком многих частиц является сальный блеск.
Для выявления клеточного строения из объекта отделяют микрочастицу (размер до 1 мм в наибольшем измерении) и переносят в каплю 10—25% раствора уксусной кислоты на предметном стекле. Стекло помещают под стереомикроскоп и прослеживают за изменениями микрочастицы. В ткани человека и животного они выражаются в обесцвечивании, набухании, просветлении, распаде на более мелкие части. С частицами небиологического происхождения подобных изменений не происходит.
Растительная ткань также мало изменяется и слабо набухает. Препаровальными иглами тщательно измельчают материал. Из плотных частиц приготавливают так называемые давленные препараты.
Клеточное строение объекта и особенности растительных клеток, отличающие их от клеток животных, можно выявить на неокрашенных препаратах. Исследование производят на любом световом микроскопе с увеличением 100—200х при закрытой апертурнои диафрагме. Препараты должны быть смочены, поэтому их не высушивают.