Микроскопия крови, волос для определения пола. Оценка результатов выявления пола
Сгустки высохшей крови, в которых сильно сжатые лейкоциты заключены в фибрин,— наиболее неблагоприятный объект для исследования. Они образуются в тех случаях, когда большой объем крови попадает на негигроскопическую поверхность или не успевает быстро впитаться на гигроскопическом предмете-носителе.
Высыхание кровяных сгустков происходит длительное время, в течение которого в лейкоцитах развиваются выраженные аутолитические изменения. В то же время в следах крови, настолько тонких, что через них просвечивает поверхность предмета, как правило, обнаруживаются ядра, пригодные для исследования.
В препаратах, приготовленных из волос и следов слюны, эпителиальные клетки встречаются в виде отдельных клеток, групп клеток и фрагментов слоя; в препаратах волос часто попадаются изолированные ядра. При правильной окраске азур-эозином ядра большинства клеток фиолетовые, цитоплазма розовая.
Ядра клеток с нежной хроматиновой структурой часто имеют розово-фиолетовый цвет. Пикнотичные ядра, а также ядра клеток, лежащих в 2—3 слоя, могут окрашиваться в сине-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски Х-хроматииа заметно больше, чем других хроматиповых структур ядра; кроме того, тельце Х-хроматина независимо от его формы выделяется четкими контурами.
При исследовании волос наилучшие результаты получают, изучая эпителиальные клетки с крупными, светлыми ядрами, имеющими сетчатую структуру хроматина. В более мелких и интенсивнее окрашенных ядрах Х-хроматин выявляется хуже, поэтому клетки с такими ядрами менее удобны для исследования.
Учету подлежат ядра эпителиальных клеток с неповрежденной хроматиновой структурой, лишенные признаков дегенерации. Следует также внимательно исследовать ядра при наличии в препарате микроорганизмов и частиц, которые, располагаясь па оптическому краю ядра, могут имитировать Х-хроматии.
Оценка результатов выявления пола
Если бы все полиморфно-ядерные лейкоциты женской крови имели вырост, специфичный для пола, а в ядрах мужских лейкоцитов он отсутствовал, та затруднений в диагностике пола не было.
Сложность диагностики обусловлена, с одной стороны, большой вариабельностью частоты нейтрофилоцитов с выростами, специфичными для пола, в крови у женщин и наличием похожих образований в ядрах нейтрофилоцитов у мужчин. С другой стороны, тем, что число пригодных для исследования ядер нейтрофилоцитов, извлекаемых из следов крови, зависит от объема крови, образовавшей след, исходной концентрации лейкоцитов, внешних условий, при которых происходит высыхание крови, «возраста» следа крови (из старых следов извлекается меньше лейкоцитов, чем из свежих).
Кроме этого, нужно иметь в виду, что определению половой принадлежности предшествуют исследования с целью установления наличия видовой и групповой принадлежности крови, что в значительной мере уменьшает размеры исследуемого объекта. Все это пришлось учитывать при разработке методики диагностики половой принадлежности крови в следах на основании изучения частоты нейтрофилоцитов со специфическими для пола выростами типов А и В.