Приготовление препаратов крови для выявления Х-хроматина. Выявление пола по крови и слюны
Окрашивание гемоглобина гематологическими красками обусловило необходимость полного его удаления. Для этого объект извлекают из пробирки, а ее содержимое центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин. Уксусную кислоту отсасывают под контролем глаза пастеровской пипеткой, оставляя над осадком небольшой слой жидкости.
Если извлекаемая жидкость окрашена, то в пробирку наливают новую порцию раствора уксусной кислоты до первоначального объема, взбалтывают осадок и вновь центрифугируют. Этот прием повторяют до тех пор, пока слой жидкости над осадком не станет бесцветным.
Центрифугирование позволяет не только полностью освободить среду от следов гемоглобина, но и сконцентрировать лейкоциты в 1—2 каплях жидкости. Для того чтобы лейкоциты занимали наименьшую площадь в препарате, осадок, не размазывая, переносят в виде капли на предметное стекло.
Пятна крови на стекле, металле и других не впитывающих жидкость предметах-носителях. Соскоб крови с предмета-носителя помещают в пробирку, куда добавляют уксусную кислоту так, как это указано выше. Если на вещественном доказательстве имеется пятно крови малого размера, допустимо непосредственно нанести на часть пятна 1— 3 капли уксусной кислоты и накрыть часовым стеклом, чтобы кислота не испарилась.
Через 10—15 мин жидкость с кровью отсасывают и переносят в пробирку. Как правило, одной ее порции бывает недостаточно для того, чтобы клеточные элементы крови полностью перевести в жидкость, поэтому раствор уксусной кислоты наносят несколько раз. В том случае, если кровь плохо «растворяется» (старые пятна), то ее соскабливают концом пастеровской пипетки в капле уксусной кислоты, нанесенной на пятно, и соскоб вместе с жидкостью переносят в пробирку. Далее поступают так же, как и с пятном, находящимся на текстильной ткани.
Методика предусматривает возможность извлечения лейкоцитов из следов крови, находящихся на различных предметах-носителях, как гигроскопических, так и негигроскопических. В каждом конкретном случае эксперт должен самостоятельно решить, каким способом надо пользоваться, чтобы с меньшими потерями перенести отмытые от гемоглобина лейкоциты на предметное стекло.
Волосы. Корневой участок волоса помещают в каплю 10— 25% раствора уксусной кислоты на предметном стекле. С этой целью под стереомикроскопом отрезают верхнюю часть стержня, а предметное стекло с корнем волоса кладут во влажную камеру (для свежевырванного волоса — на 10—15 мин, для волос большей давности — на 40—60 мин).
Препараты, приготовленные из волос, следов крови и слюны, высушивают, фиксируют в бюксе от 3 до 15 мин (в зависимости от толщины препарата) метиловым спиртом и окрашивают азурэозиновой смесью в течение 20—30 мин. Краску смывают слабой струей водопроводной воды.
При окраске эпителиальных клеток слизистой оболочки рта более четкие результаты можно получить, используя следующий прием. Препараты окрашивают в течение 30—40 мин, т. е. немного перекрашивая их, а затем дифференцируют (удаляя избыток красителя), опуская на 2—3 с в бюкс с подкисленной водой.
Воду готовят, добавляя на 100 мл дистиллированной воды 1 мл 1% раствора уксусной кислоты. После дифференцировки препараты тщательно промывают под слабой струей водопроводной воды и высушивают. На одном конце предметного стекла делают надпись, указывая номера экспертизы, объекта, препарата.
