• Для удаления октамеров при транскрипции с участием РНК-полимеразы и повторной сборки гистонов в нуклеосомы необходимо участие дополнительных факторов
Удаление нуклеосом с ДНК является ключевым моментом всех стадий транскрипции. Лучше всего этот процесс исследован на стадии инициации. Активные промоторы обладают сайтами с высокой чувствительностью к ДНКазе, поскольку октамеры гистонов были удалены с ДНК.
Удаление октамеров требует реконструкции комплексов, которые набираются, комплектуются с помощью транскрипционных факторов и которые используют энергию, поставляемую при гидролизе АТФ для того, чтобы изменить структуру хроматина. Это означает, что РНК-полимераза начинает синтез на коротком отрезке ДНК, свободном от нуклеосом.
Для того чтобы синтез РНК продолжался дальше, октамеры гистонов должны быть удалены. Затем, чтобы не допустить появления не закрытой белком ДНК, октамеры должны собраться вновь в ходе транскрипции.
Транскрипция РНК-полимеразой II in vitro требует участия белка, который называется FACT и который по свойствам напоминает фактор элонгации транскрипции. (FACT представляет собой аббревиатуру от "facilitates chromatin transcription» и не является частью РНК-полимеразы, хотя специфическим образом связывается с ней в фазе элонгации.) Этот фактор состоит из двух субъединиц, имеющих общую структуру у всех эукариот, Он связан с хроматином активных генов.
При добавлении FACT к изолированным нуклеосомам они теряют димеры Н2А-Н2В. При транскрипции in vitro фактор превращает нуклеосомы в «гексасомы», у которых отсутствуют димеры Н2А-Н2В. Это позволяет считать FACT частью механизма, ответственного за удаление октамеров при транскрипции. Белок также может участвовать в сборке нуклеосом после транскрипции, поскольку он способствует их образованию из коровых гистонов.
На рисунке ниже представлена модель, описывающая удаление Н2А-Н2В из нуклеосомы под действием FACT, происходящее впереди РНК-полимеразы, и затем добавление их к нуклеосоме, формирующейся позади фермента. Для завершения процесса могут понадобиться и другие факторы. Также FACT необходим для осуществления других процессов, при которых происходит удаление нуклеосом, например таких, как репликация и репарация ДНК.
Для поддержания структуры хроматина в других транскрибируемых регионах требуются другие факторы. Вероятно, они также принимают участие в процессах разборки-сборки нуклеосом, но мы не располагаем более подробной информацией об их функциях.
Разборка октамеров гистонов, необходимая для удаления нуклеосом, происходит до начала транскрипции.
После окончания транскрипции октамеры собираются снова. Процесс разборки, по-видимому, начинается с высвобождения димера Н2А-Н2В гистонов.
