Методика реакции на неспецифические эстеразы - оценка результатов
Принцип реакции на неспецифические эстеразы - метод Малонея. Нафтол AS—D-хлорацетат гидролизуется эстеразами и в присутствии какой-либо соли диазония (Fast garnet GBG) образует соединение светлокрасного цвета.
Реагенты для реакции на неспецифические эстеразы:
1) Закрепитель — древесный спирт (9 частей) + формалин (1 часть).
2) Нафтол AS-D-хлорацетат.
3) Ацетон.
4) Буфер веронал, показатель водорода 7,4 : 41,9 мл соляной кислоты М/10 и 58,1 мл натриевого веронала М/10.
5) Fast garnet GBC.
6) Гемалаун Майера: растворить 50 г калиевых квасцов в 1 000 мл теплой дистилированной воды, добавить 1 г гематоксилина.
После его растворения добавить 0,2 г йодноватокислого натрия, вызывающего быстрое окисление гематоксилина. Раствор оставить 3—4 дня для созревания. Перед потреблением отфильтровать.
Техника реакции на неспецифические эстеразы
а) закрепление свежеприготовленных мазков в древесном спирте — формалине 9/1 в течение 30 сек.;
б) промывание проточной водой;
в) инкубация при комнатной температуре — 30 мин. в следующей, свежеприготовленной среде:
— хлорацетат нафтол AS—D 20 мг
— ацетон 1 мл
— дистилированная вода 10 мл
— веронал-буфер рН 7,4 10 мл
— Fast garnet GBG 20 мг;
Результаты реакции на неспецифические эстеразы. Наличие светлокрасных зерен указывает на активность неcпецифических эстераз. Они находятся в цитоплазме клеток гранулоцитного и моноцитного рядов. В лимфоцитах отсутствует эстеразная активность.
Практическая значимость реакции на неспецифические эстеразы. Способствует дифференциации острых моноцитоидных и гранулоцитных лейкемий от лимфоидных.
