Гематология
  Домой Медицинский фото атлас Психология отношений Медицинские видео ролики Медицинская библиотека Консультация врача  
Гематология:
Гематология
Физиология крови
Методы исследования
Анемии
Острые лейкозы
Миелодиспластические синдромы (МДС)
Хронические лейкозы
Лимфомы
Гистиоцитозы - гистиоцитоз Х
Макроглобулинемии
Коагулопатия
Патология тромбоцитов
Переливание крови
Трансплантация стволовых клеток
Книги по гематологии
Иностранные книги по гематологии
Рекомендуем:
Остальные разделы:
Абдоминальная хирургия
Анатомия человека
Акушерство
Биология
Генетика
Гепатология
Гигиена труда
Гинекология
Гистология
Дерматология
Оз и Оз
Кардиология
Лучевая медицина
Микробиология
Неврология
Неотложная хирургия
Отоларингология
Офтальмология
Профилактика заболеваний
Психология
Пульмонология
Физиология человека
Скорая помощь
Стоматология
Топографическая анатомия
Травматология
Фармакология
Необходимое:
Книги по медицине
Видео по медицине
Фотографии по медицине
Консультации врачей
Форум
 

Методика реакции на щелочную фосфатазу лейкоцитов (ЩФЛ) - оценка результатов

Принцип реакции на щелочную фосфатазу по методу Леонарда, Израэльса и Вилькинсона. Щелочная фосфатаза лейкоцитов, после инкубации последних на глицерофосфатной питательной среде, при щелочном показателе водорода, расщепляет глицерофосфат и выделяет фосфорные ионы. Последние реагируют последовательно с нитратом кальция и нитратом кобальта. В конечном итоге образующийся фосфат кобальта реагирует с сернокислым аммонием образуя сульфид кобальта, выявляемый в виде черного осадка.

Реагенты для реакции на щелочную фосфатазу:
1) Закрепитель: винный спирт 96° (9 частей) + 40% формалин (1 часть).
2) Раствор питательной среды, состоящий из тампонированного b-глицерофосфата натрия, содержащего 15 мл 3,2% b-глицерофосфата натрия, 15 мл 10% натриевого веронала, 15 мл сернокислого магния М/10, 22,5 мл 2% нитрата кальция и 82,5 мл дистилированной воды. Раствор должен быть свеже приготовленным при окончательном показателе водорода 9,2.
3) 2% нитрат кобальта — 100 мл.
4) Слабый раствор сульфида аммония (1—2 мл сульфида на 80 мл дистилированной воды).
5) Разбавленный раствор Гимза (10%).

Техника реакции на щелочную фосфатазу

1) Закрепление мазков в смеси спирт-формалин — 30 сек.
2) Промывание проточной водой.
3) Инкубация в растворе питательной среды, состоящей из b-глицерофосфата при 37° — 3 часа.
4) Обработка предметного стекла раствором нитрата кобальта — 5 мин.
5) Тщательное промывание дистилированной водой.
6) Погружение предметного стекла в раствор сульфида аммония — на 10 сек.
7) Тщательное промывание проточной водой.
8) Контрастная окраска раствором Гимза — 25 мин. 9) Промывание проточной водой.

реакция на щелочную фосфатазу лейкоцитов

Рекомендуется при реакции на щелочную фосфатазу:
а) строгое соблюдение сроков реакции;
б) применение положительного контрольного препарата (мазок крови крысы или беременной женщины):
в) использование свежеприготовленных мазков.

Результаты реакции на щелочную фосфатазу

Наличие в зрелых нейтрофильных гранулоцитах цитоплазмы отдельных или скученных зерен черного цвета указывает на активность щелочной фосфатазы лейкоцитов. Степень активности определяется по резкости окраски и обозначается цифрами 0, 1, 2.

Для цифрового отображения следует определить показатель ЩФЛ, для чего необходимо проследить активность фосфатазы по меньшей мере на 100 гранулоцитах. Процент гранулоцитов 1 степени складывается с двойным процентом гранулоцитов 2 степени. Не учитываются в расчет показателя гранулоциты, лишенные активности.

При нормальных условиях значения показателя ЩФЛ колеблятся от 10 до 60. Поскольку у 16% лиц в норме показатель ЩФЛ меньше 10, низшим пределом следует считать 1—2.

Практическое значение реакции на щелочную фосфатазу заключается в возможности дифференцировать:
а) хроническую гранулоцитную лейкемию, при которой ЩФЛ очень занижен или отсутствует, от лейкемоподобной реакции, при которой значения весьма высокие;
б) хроническую гранулоцитную лейкемию от миелоидной метаплазии с миелосклерозом. Нормальный или повышенный показатель ЩФЛ свидетельствует о наличии миелоидной метаплазии, опровергая возможность лейкемии;
в) различные цитологические виды острой лейкемии. При острой лимфобластической и моноцитной лейкемии активность ЩФЛ высокая по сравнению с острой гранулоцитной лейкемией, когда последняя занижена. Для достоверности результата больной не должен подвергаться предварительной кортикотерапии;
г) вторичную полиглобулию, при которой ЩФЛ нормальный или заниженный, от истинной полицитемии, при которой этот показатель значительно повышается (более 100).

Активность ЩФЛ бывает заниженной или просто отсутствует и при иных заболеваниях, таких как, ночная пароксизмальная гемоглобинурия, стойкая анемия, дисэритропоэтическая типа II анемия, инфекционный мононуклеоз, после рентгенотерапии.

Высокая активность ЩФЛ отмечается во время беременности и после кортикотерапии.

- Читать далее "Методика реакции на костномозговой гемосидерин - оценка результатов"


Оглавление темы "Методы исследования в гематологии":
  1. Методика подсчета ретикулоцитов. Норма ретикулоцитов в крови
  2. Исследование эритроцитов в мазке крови - характеристика
  3. Исследование лейкоцитов в мазке крови - характеристика
  4. Исследование тромбоцитов в мазке крови - характеристика
  5. Характеристика эритроцитов - расчет цветового показателя
  6. Методика ШИК-реакции на гликоген - оценка результатов
  7. Методика реакции на пероксидазу - оценка результатов
  8. Методика реакции на щелочную фосфатазу лейкоцитов (ЩФЛ) - оценка результатов
  9. Методика реакции на костномозговой гемосидерин - оценка результатов
  10. Методика реакции на неспецифические эстеразы - оценка результатов
Загрузка...

   
MedUniver.com
ICQ:493-344-927
E-mail: reklama@meduniver.com
   

Пользователи интересуются:

Будем рады вашим вопросам и отзывам:

Полная версия сайта