МедУнивер - MedUniver.com Все разделы сайта Видео по медицине Книги по медицине Форум консультаций врачей  
Рекомендуем:
Гематология:
Гематология
Физиология крови
Методы исследования
Анемии
Полицитемии
Острые лейкозы
Миелодиспластические синдромы (МДС)
Хронические лейкозы
Лимфомы
Гистиоцитозы - гистиоцитоз Х
Макроглобулинемии
Коагулопатия
Патология тромбоцитов
Переливание крови
Трансплантация стволовых клеток (костного мозга)
Кожа при болезнях крови
Книги по гематологии
Иностранные книги по гематологии
Форум
 

Метод биочипов (DNA microarray) в диагностике генетических мутаций: принципы, возможности

Секвенирование генома человека и создание библиотеки кДНК сделало возможным синтез праймеров и индикаторных зондов, комплементарных к любой последовательности ДНК, и анализ экспрессии множества генов. Благодаря этим возможностям создан быстрый и эффективный метод биочипов (DNA microarray), который позволяет анализировать дифференциальную экспрессию тысяч и десятков тысяч генов одновременно.

На стеклянные пластинки размером 1 см2 (чипы) наносят амплификаты тканевой мРНК в нескольких разных разведениях и меченные флюоресцентной меткой индикаторные ДНК-зонды, комплементарные всем интересующим последовательностям ДНК. После гибридизации на чипе проводят точное измерение дифференциальной экспрессии генов по сравнению интенсивности флюоресценции с контрольными образцами определенной концентрации.

метод биочипов в диагностике мутаций

Этот метод в модифицированном виде используется для сравнения профилей генной экспрессии в различных образцах, например в опухолевой и соответствующей нормальной ткани. На чип точечно наносят ДНК-зонды, комплементарные интересующим последовательностям ДНК. Выделенную из экспериментального образца тотальную тканевую мРНК амплифицируют в ретротранскриптазной ПЦР и метят ее во время обратной транскрипции (синтеза ДНК по РНК-матрице) красным флюорохромом.

Затем меченый амплификат смешивают с амплификатом сравниваемого образца, меченным в параллельной реакции зеленым флюорохромом. Полученную смесь наносят на биочип, где амплификаты гибридизуются с иммобилизованными в определенных точках чипа индикаторными зондами.

В результате получают соотношение интенсивности двуцветной флюоресценции для каждого элемента (гена), соответствующее тому образцу, в котором данный элемент (ген) экспрессируется активнее. В настоящее время разрабатываются коммерческие образцы биочипов с минимизированным количеством маркеров для диагностических целей.

Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021

- Также рекомендуем "Что сдают для ПЦР при болезнях крови? Материалы для молекулярно-генетических исследований в гематологии"

Оглавление темы "Методы обследования в гематологии":
  1. Метод биочипов (DNA microarray) в диагностике генетических мутаций: принципы, возможности
  2. Что сдают для ПЦР при болезнях крови? Материалы для молекулярно-генетических исследований в гематологии
  3. Показания для ПЦР (полимеразной цепной реакции) в гематологии
  4. Показания для УЗИ органов и сосудов брюшной полости в гематологии
  5. Рентгенологические методы исследования в гематологии: виды, показания
  6. Рентгенологические изменения органов в гематологии - рентгеносемиотика
  7. Компьютерная томография в гематологии - изменения органов при болезнях крови
  8. КТ изменения лимфоузлов - дифференциация лимфогранулематоза и неходжкиновских лимфом
  9. МРТ изменения лимфоузлов у гематологических больных
  10. Радионуклидные методы диагностики в гематологии - сцинтиграфия, позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ)
Медунивер Мы в Telegram Мы в YouTube Мы в VK Форум консультаций врачей Контакты, реклама
Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.