Выявление антитромбоцитных антител: тест угнетения ретракции плазматического сгустка (ТУРС)
Способы выявления антитромбоцитных антител можно отнести к условно иммунологическим и коагулологическим, предполагающим характерные аспекты функции тромбоцитов: расплавление меченных Cr51 тромбоцитов, "release" фактора 3 тромбоцитов, угнетение ретракции плазматического сгустка.
В настоящее время весьма полезными считаются следующие методы: основанный на угнетении ретракции плазматического сгустка (Поппа-Энаке), и основанный на выделении фактора 3 тромбоцитов (Карпаткина).
Тест угнетения ретракции плазматического сгустка
Тест угнетения ретракции плазматического сгустка (ТУРС) основывается на угнетении — путем иммунологического конфликта — выделения фактора 7 тромбоцитов (Тромбостенин, обеспечивающий тромбодинамическую функцию тромбоцитов). Проследить поведение стандарного числа тромбоцитов (100 000 ± 10 000) изогруппного контрольного лица в норме, в собственной плазме, после инкубации с сывороткой предполагаемого больного — носителя антитромбоцитных антител.
Одновременно обработать ретракцию плазматического сгустка контрольного лица в норме, следовательно без воздействия сыворотки больного, что, для метода представляет значение ссылочного материала.
Техника теста угнетения ретракции плазматического сгустка. В пробирку диаметром 16 мм ввести отмеченные материалы, в следующем порядке: 3,4 мл сыворотки исследуемого больного; 1,5 мл плазмы контрольного лица в норме, со стандартным числом тромбоцитов (отобранной и приготовленной в обработанной силиконом пробирке); подвергнуть 30-минутной инкубации в ванне, при +37°С; добавить 0,1 мл раствора тромбина.
Перемешать содержимое и после образования сгустка (20—30 сек.) продержать пробу 60 мин. в ванне, при температуре +37°С; спустя 2 и 10 мин. после образования сгустка бережно отделить его очень тонкой палочкой. По истечении срока инкубации извлечь сгусток фибрина пинцетом, провести им по стенке пробирки, чтобы стекла жидкость и отбросить. Оставшуюся сыворотку измерить в градуированном цилиндре, полученное значение помножить на 20. Нормальный показатель больше 85%.
Результаты теста угнетения ретракции плазматического сгустка. Полученный таким образом результат вычесть из значения, полученного при определении ретракции сгустка контрольного лица в норме (которое должно равняться или превышать 85%). Возможны следующие положения:
— равенство значений либо разница до 5% = результат нормальный;
— разница между ними составляет 5—10% = слабо положительный результат;
— разница больше 10% = результат положительный, что означает наличие антитромбоцитных антител, угнетающих тромбодинамическую функцию тромбоцитов.
